РАЗДЕЛ ВТОРОЙ

Статья  помещена  на  сайте  15  декабря  2013  года.

ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ ПРОСТЕЙШИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИ и

ЭВОЛЮЦИОННО СХОДНЫЕ С Besnoitia besnoiti

Морфологически и эволюционно бесполые стадии B.besnoiti сходны с трофозоитами и мерозоитами токсоплазм, неоспор и саркоспоридий. Этих паразитов обычно называют  токсоплазмидами. Такого названия и мы будем придерживаться в последующих наших обсуждениях.

Toxoplasma gondii. Морфологически бесполые стадии развития токсоплазм - трофозоиты, мерозоиты и спорозоиты  сходны между собой, как на уровне ультратонкого строения, так и на уровне светового микроскопа. В световом микроскопе названные стадии развития токсоплазм видны в виде полулунных образований с центрально расположенным ядром. Однако на определённых стадиях своего развития токсоплазмы могут изменять свою форму. Так, например, в тканевых цистах, когда в их цитоплазме происходит накопление амилопектина, ядра могут быть сдвинуты к одному из полюсов клетки. При прохождении кишечного цикла, в организме кошек, кроме полулунных форм токсоплазм, встречаются и продолговато – овальне  вегетативные стадии паразитов (Фото 1 -4).

Фото 1. Мазок отпечаток из брюшного экссудата белой мыши павшей на седьмые сутки после внутрибрюшинного экспериментального заражения трофозоитами токсоплазм вирулентного штамма «CDN» выделенного от собаки. На фотографии показаны полулунные трофозоиты с центральным расположением ядер. Окр. По Романовскому – Гимза, ув. Об.90 х ок.10.

Фото Х. Мазок  -  отпечаток  слизистой  оболочки  повздошной   кишки  котёнка  на  четвёртые -?  сутки  после  заражения. В  эпителиальной  клетке,  видны    полулунные  мерозоиты    с  эксцентрично  расположенными  ядрами.  Окраска  по  Романовскому - Гимза.

Фото 2. Мазок – отпечаток слизистой оболочки тощей кишки котёнка на четвёртые сутки после перорального заражения цистами токсоплазм слабовирулентного штамма «LTI» . В цитоплазме кишечного эпителия видна группа мерозоитов вытянутой, продолговато – овальной формы, с центрально расположенными ядрами. Окр. По Романовскому – Гимза. Ув. Об. 90 ок. 10.

Фото 3. Мазок – отпечаток слизистой оболочки тощей кишки котёнка на пятые сутки после перорального заражения цистами токсоплазм слабовирулентного штамма «LTI» . Показаны утончённые, полулунной формы мерозоиты с центральным расположением ядер. Окр. По Романовскому – Гимза. Ув. Об. 90 ок. 10.

Фото 4. Мазок  - отпечаток  слизистой  оболочки  подвздошной  кишки  котёнка  убитого  на  6  сутки  после  заражения.  Показаны  мерозоиты  с  центрально  расположенными  ядрами  и  «овалы» (макрогамонты). Окраска  по  Романовскому  - Гимза.

Необходимо особо подчеркнуть, что у токсоплазм как и у безноитий и других токсоплазмид после проникновения в  организм  промежуточных   хозяев  отмечается  два  этапа  размножения. Первый этап токсоплазмы, вначале,  проходят  в  клетках  крови – нейтрофилах, лимфоцитах, моноцитах. Второй  этап в клетках РЭС  и  других клетках организма  хозяина. В клетках крови токсоплазмы  не только  размножаются  до  образования  типичных цитоплазматических  псевдоцист, но  и  используют  их  для  миграции в различные органы и ткани животных(Фото 5 -11).

Фото 5.  Гистологический  срез  печени  щенка  экспериментально  зараженого  трофозоитами  вирулентного  штамма CDN. Показана  фаза  токсоплазмозного  сепсиса  на  6  сутки  после  внутрибрюшинного  заражения.   В  просветах  межбалочных  капилляров  видно  большое  количество   как    свободных,  внеклеточных  тахизоитов,  так  и  находящихся  в  цитоплазме и ядрах  гепатоцитов.   Морфологические  структуры  отдельных  из  них  свидетельствуют  о  внеклеточном   делении   тахизоитов. Окраска  железным  гематоксилином  и  эозином. Ув. Ок.90 х Об.7.

 

Фото 6. Мазок -  отпечаток из  брюшного  экссудата  белой  мыши. Показан,  хорошо  сформированный   трофозоит T. gondii в  цитоплазме  нейтрофила. Ув. Об. 100 х ок. 7.

Фото 7. Мазок, приготовленный из брюшного экссудата белой мыши экспериментально заражённой трофозоитами токсоплазм вирулентного штамма «CDN» и погибшей от острого токсоплазмоза на седьмые сутки после заражения. Люминесцентная микроскопия. Препарат обработан акрединовым оранжевым. Показаны два трофозоита в цитоплазме лимфоцита. Цитоплазма лимфоцита гипертрофирована. Ув. Об. 100 х ок. 7.

Фото 8. Пластинчатый препарат брызжейки белой мыши убитой на 4 сутки после внутрибрюшинного заражения токсоплазмами вирулентного штамма «CDN». Показана типичная псевдоциста в цитоплазме моноцита. Окр. По Романовскому – Гимза, ув. Об. 100 ок. 10.

Фото 9. Гистологический срез селезёнки щенка павшого от подострого экспериментального токсоплазмоза. Показано размножение токсоплазм в спленоцитах красной пульпы. В одном спленоците видна типичная псевдоциста (показано стрелками) Окр. По Мак - Манусу. Ув. Об.100 х ок 7.

 

Фото 10. Гистологический  срез  печени   кота,    на  15 сутки   после   экспериментального    заражения  Показана  псевдоциста  в  гипертрофированной  клетке  Купфера  и  группа   внеклеточно  делящихся  токсоплазм  в  межбалочном  капилляре (Показано  стрелками).

 

Фото 11.  Гистологический  срез  печени  щенка,  экспериментально  заражённого   вирулентным  штаммом  токсоплазм CDN. Показана типичная псевдоциста  в  клетке  Купфера. Окр. Железным  гематоксилином и  эозином. Ув. Об.100 х ок 10.

Интересно  отметить,  что  подобные  псевдоцисты  обнаруживаются  у  собак  при  пироплазмозе  собак (Фото 12).

 

Фото 12.   Фотография  взята  из  работы  Alexandre Paulino Loretti,  и Severo Sales Barros^b «Hemorrhagic disease in dogs infected with an unclassified intraendothelial piroplasm in southern Brazil»,  опубликованной  в  2005 году  в  Бразилии.

Показана  типичная  псевдоциста  в  эндотелиальной  клетке  почки (клетке РЭС)  при  экспериментальном  пироплазмозе  собаки.

(Bone marrow, dog, experimental case. Smear. Many zoites are found in the cytoplasm of an endothelial cell. Panoptic. Bar = 4.5 μm).

В гистологических срезах морфология токсоплазм зависит от того, в какой части паразитарной клетки прошол срез. Поэтому в гистологических срезах можно видеть не только полулунные формы паразитов, но округлые и продолговато овальные. Размеры токсоплазм в гистологических срезах значительно меньше, чем в мазках, что связано с фиксацией материала и заливкой его в парафин. Однако, как и в мазках отпечатках, так и в гистологических срезах чётко прослеживается морфология паразита, их расположение в тканях и клетках и даже способы деления (Фото 12 - 15).

Фото 13. Гистологический срез капсулы селезёнки белой мыши убитой на пятые сутки после внутрибрюшинного заражения вирулентным штаммом токсоплазм (CDN). Хорошо видно большое количество внеклеточных токсоплазм. И, судя по морфологии паразитов, часть из них находится в состоянии деления. Окр. Железным гематоксилином и эозином. Об.100 х ок 10.

 

Фото 14. Гистологический срез селезёнки щенка павшого от подострого экспериментального токсоплазмоза. Показано внеклеточное размножение токсоплазм в венозных  синусах,  ядрах и цитоплазме спленоцитов (показано стрелками) Окр. По Мак - Манусу. Ув. Об.100 х ок 10.

Фото 15. Гистологический срез ворсинки подвздошной кишки котёнка на третьи сутки после перорального заражения цистами токсоплазм слабовирулентного штамма «LTI». Люминесцентная микроскопия. Показаны овальной формы трофозоиты в эпителии ворсинки. Препарат обработан акрединовым оранжевым. Ув. Об.90 х ок.10.

Фото 16. Гистологический срез тощей кишки котёнка через 10 часов после перорального введения трофозоитов вирулентного штамма «RH» . Показан первичній очаг с микронекрозом слизистой оболочки. Видно большое количество трофозоитов в просвете кишечника, а так же в цитоплазме лимфоцитов и моноцитов. Хорошо виден моноцит, цитоплазма которого гипертрофирована и инвазирована токсоплазмами (Показано стрелкой). Окр. Железным гематоксилином и эозином, ув. Об.100 х ок. 10.

Из приведённых фотографий хорошо видно, что токсоплазмы, как и безноитии, на разных этапах эндогенного размножения, способны не только изменять свою форму, размеры, инвазировать лимфоциты и моноциты, но и активно в них размножаться, образуя типичные цитоплазматические псевдоцисты. Судя по опубликованным данным, сходные процессы можно наблюдать и у Neospora caninum (фото 16).

Фото 17. Тахизоиты(трофозоиты) Neospora caninum в лимфоцитах собаки. Фото взято из работы Jackie Barber. Журнал Waltham 1998г.

ОБРАЗОВАНИЕ ЦИСТ Toxoplasma gondii В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ БЕЛЫХ МЫШЕЙ

Одной из особенностей токсоплазмид является способность их, в фазу вегетативного размножения, образовывать в различных органах и тканях цисты размножения. Однако у каждого вида токсоплазмид есть излюбленные места локализации тканевых  цист .

Так, например, для токсоплазм «излюбленным» местом является головной мозг и миокард, для саркоспроридий - скелетные мышцы и миокард, для безноитий крупного рогатого скота - дерма, слизистая оболочка влагалища и склера (конъюнктива), для неоспор скелетные мышцы и миокард. С чем связана такая локализация токсоплазмид в организме хозяина, точно не установлено. Большинство исследователей, склонны полагать, что специфичность локализации токсоплазмид, связана с дальнейшей циркуляцией паразитов в природе.

В настоящее время, достоверно установлено, что цисты токсоплазмид образуются двумя путями:

Первый путь - это когда псевдоциста превращается в цисту. Этот  способ  образования  тканевых  цист наблюдается  иногда  у  безноитий  крупного  рогатого  скота,  но  не  у  токсоплазм.; Второй – это когда после внеклеточного размножения и развития образуется колония паразитов, которая формирует вокруг себя разной толщины оболочку.

В отношении образования цист токсоплазм до сих пор нет единого мнения. Общепринятым мнением исследователей является мнение о том, что цисты токсоплазм в головном мозге животных и человека образуются путём превращения псевдоцисты в цисту.

При проведении нами экспериментальных исследований на белых мышах, щенках и кошках мы не в одном случае не наблюдали в головном мозге превращения псевдоцист в цист. Проведённые нами экспериментальные исследования на белых мышах показали, что в головном мозге, цисты образуются путём внеклеточного размножения брадизоитов в белом веществе и только после образования большой колонии токсоплазм, паразиты формируют цистную оболочку (А.Бугаев, 1974, 2005). Образованию цист токсоплазм предшествует гематогенное проникновение токсоплазм в белое вещество головного мозга. Затем, в белом веществе головного мозга, внеклеточно, паразиты делится путём шизогонии. Образовавшиеся мерозоиты продолжают делитсят путём эндодиогении и полиэндодиогении. После того как образуется большая колония паразитов, вокруг них формируется оболочка цисты (Фото 1 - 6).

Фото 1. Гистологический срез коры головного мозга белой мыши убитой на 10 сутки после внутрибрюшинного заражения токсоплазмами слабовирулентного штамма LTI. Показан внеклеточный шизонт в белом веществе головного мозга. Окр. Железным гематоксилином и эозином. Ув. Об.100 х ок. 7.

Фото 2. Гистологический срез головного мозга белой мыши после внутрибрюшинного её заражения токсоплазмами штамма LTI. Показан распад шизонта на множество мерозоитов. Мерозоиты дают резко положительную реакцию на нейтральные мукополисахариды. Окраска по Мак – Манусу на нейтральные мукополисахариды. Ув. Об.100 х ок. 10.

Фото 3. Гистологический срез головного мозга белой мыши после внутрибрюшинного её заражения токсоплазмами штамма LTI. Хорошо виды три внеклеточных колонии токсоплазм, будущих цист. Вокруг колоний оболочка цист отсутствует. Окр. Гематоксилин - эозином. Ув. Об. 100 х ок.10.

Фото 4. Гистологический срез головного моза белой мыши. Показаны четыре колонии токсоплазм находящиеся на разных стадиях формирования оболочек цист. Верхние две колонии располагаются свободно в белом веществе коры головного мозга. Вокруг двух нижних колоний уже видны сформировавшиеся, хорошо контурированные оболочки. Окр. Железным гематоксилином с докраской эозином и метиленовой синькой. Ув. Об. 100 ок.10.

Фото 5. Гистологический срез стволовой части головного мозга белой мыши. Внизу видна небольшая внеклеточная колония токсоплазм, вверху колония паразитов вокруг которой хорошо видна тонкая базофильная оболочка. Окра. Гематоксилин – эозином, ув. Об.100 х ок. 10.

Фото 6. Гистологический срез коры головного мозга белой мыши после внутрибрюшинного её заражения токсоплазмами слабовирулентного штамма LTI.  В белом веществе коры мозга видна хорошо сформированная, внеклеточно расположенная циста с чётко контурированной оболочкой и огромным количеством брадизоитов. Окр. Железным гематоксилином и эозином. Ув. Об.100 х ок.15.

Фото 7. Мазок - отпечаток коры головного мозга белой мыши, через 25 суток после экспериментального заражения её слабовирулентным штаммом токсоплазмам LTI. Показана хорошо сформированная, классическая, внеклеточная циста, с огромным количеством брадизоитов. Окр. Гематоксилин - эозином, ув. Об. 100 х ок. 10.

Для брадизоитов цист токсоплазм, как и для брадизоитов цист безноитий, характерным является наличие в их цитоплазме большого количества нейтральных мукополисахаридов (амилопектина). С помощью окраски препаратов по Мак - Манусу цисты токсоплазм и даже небольшие внеклеточные колонии брадизоитов хорошо выявляются в гистологических срезах (Фото 8). Следует особо подчеркнуть, что амилопектин расположен только в цитоплазме брадизоитов. В свободном виде амилопектин ни в цистах, ни в колониях токсоплазм не выявляется. Напомним, что при формировании цист безноитий в дерме крупного рогатого скота, гранулы амилопектина в больших количествах обнаруживаются как в цитоплазме паразитов, так и между ними. Этот факт свидетельствует о том, что образование оболочек цист размножения у T. gondii и толстостенных цист у B.besnoiti заметно отличаются.

Фото 8. Гистологический срез коры головного мозга. Показана хорошо сформировавшаяся циста, с чётко видимой тонкой базофильной оболочкой. Рядом, в белом веществе, видна небольшая внеклеточная колония токсоплазм. Цитоплазма паразитов и в сформированной цисте и внеклеточной колонии даёт интенсивную реакцию на нейтральные мукополисахариды. Окр. По Мак - Манусу, Ув. Об. 100 х ок. 10.

В гистологических срезах головного мозга, цисты токсоплазм хорошо выявляются в люминисцентном микроскопе при о обработке препаратов акридиновым оранжевым. При этом, ядра паразитов, как и ядра глии флюоресцируют светло - зелёным светом, тогда как амилопектин в цитоплазме паразитов флюоресцирует тёмно – зелёным светом (Фото 9).

Фото 9. Гистологический срез головного мозга белой мыши после внутрибрюшинного её заражения токсоплазмами штамма LTI. Обработка препарата акридиновым оранжевым. Видны две колонии токсоплазм. Паразиты обеих колоний флюоресцируют зеленым светом - цитоплазма тёмно зелёным, а ядра светло зелёным. Тёмно - зелёный свечение цитоплазмы свидетельствует о большом содержании в цитоплазме токсоплазм амилопектина. Вокруг большой колонии видна уже тонкая оболочка, которая флюоресцирует тёмно - зелёным светом. Ув. Об. 100 х ок.10.

Ещё одним объединяющим фактором токсоплазм и безноитий является поведение цист в организме хозяина. Как брадизоиты цист безноитий, так и  цист токсоплазм, на определённом этапе своего развития могут свободно покинуть колонию и дать начало новой фазе паразитарного сепсиса (Фото 10 ).

Фото 10. Гистологический срез стволовой части головного мозга белой мыши. Показан выход брадизоитов токсоплазм из цисты в просвет бокового желудочка мозга. Окр. По Мак - Манусу, ув. Об. 100 ок.10.

ОБРАЗОВАНИЕ ТКАНЕВЫХ ЦИСТ Toxoplasma gondii

В СКЕЛЕТНЫХ МЫШЦАХ БЕЛЫХ МЫШЕЙ

Проведённые нами исследования по внутримышечному заражению белых мышей изоспорами слабовирулентного штамма  токсоплазм  LTI показало, что животные легко заражаются изоспорами. У мышей отмечались явные клинические и морфологические признаки характерные для хронического токсоплазмоза. При этом на месте введения изоспор возникает первичный очаг, в котором нам удалось проследить некоторые стадии размножения и развития токсоплазм. Эти наблюдения представляют определённый интерес в плане общих фаз образования тканевых цист токсоплазм, безноитий и саркоспоридий.

В саркоплазме скелетных мышц, цисты токсоплазм образуются, так же как и в головном мозге, из одного спорозоита. Отличие заключается лишь в том, что после деления, паразиты не покидают материнскую клетку, а продолжают под общей оболочкой материнской клетки размножаться и развиватья. Каким способом происходит деление паразитов внутри  материнской  клетки (спорозоита), нам не представилось возможности установить. Однако, просматривая несколько полей препарата можно проследить преобразование оболочки спорозоита в оболочку цисты. После образования большого числа паразитов материнская оболочка  спорозоита становится общей оболочкой для колонии паразитов расположенной внутри саркоплазмы мышечного волокна (Фото 11 – 15) .

Фото 11. Гистологический срез скелетной мышцы белой мыши на месте введения изоспор токсоплазм слабовирулентного штамма LTI, на третьи сутки после заражения. В месте введения изоспор была резко выраженная клеточная реакция, а в саркоплазме мышечного волокна виден полулунной фомы спорозоит с чётко контурированным ядром. Амилопектин в цитоплазме спорозоита отсутствует. Окр. По Мак – манусу.

Фото 12. Гистологический срез скелетной мышцы белой мыши на пятые сутки после внутримышечного заражения изоспорами токсоплазм. Внутри саркоплазмы мышечного волокна виден многоядерный шизонт (Показано стрелкой). Окр. По Ван – Гизону.

Фото 13. Гистологический срез скелетной мышцы, взятой на месте введения изоспор токсоплазм через 7 суток после внутримышечного введения. Под сарколеммой мышечного волокна виден шизонт, дающий положительную реакцию на нейтральные мукополисахариды. В саркоплазме мышечных волокон нейтральные мукополисахариды выявляются в небольшом количестве. Окр. по Мак – Манусу.

Фото 14. Гистологический срез скелетной мышцы на месте введения изоспор токсоплазм, 15 сутки после заражения. В саркоплазме мышечного волокна показана циста токсоплазм, с чётко контурированной оболочкой. Цитоплазма паразитов даёт положительную реакцию на нейтральные мукополисахариды. Хорошо видно, что сарколемма мышечного волокна никакого участия в образовании оболочки цисты не принимает. Окр. По Мак - Манусу, ув. Об. 90 ок. 10.

Фото 15. Гистологический срез участка скелетной мышцы взятой через 25 суток после заражения. Проба была взята рядом с местом введения тзоспор токсоплазм. Показана сфомированая циста, с чётко видимой тонкой базофильной оболочкой. Окр. Гематоксилин – эозином, ув. Об. 40 ок.10.

Таким образом, у токсоплазм, как и у безноитий, в местах проникновения паразитов (в первичном очаге) возникает выраженная воспалительная реакция, сопровождающаяся инфельтрацией местной  ткани клетками крови и пролиферацией местных клеток РЭС.

В эксперименте  на  белых  мышах нами  прослежен  в  деталях процесс  формирования цист  токсоплазм  в  саркоплазме  скелетных  мышц  при  введении  в  них  изоспор  токсоплазм. После  выхода  спорозоитов  из  изоспор, часть  спорозоитов, проникают  в  лейкоциты и  клетки РЭС,  размножаются  и  затем  разносятся  по  всему  организму. Часть  же  спорозоитов,   проникают  в  мышечные  волокна и приступают к делению.  Каким  путём  происходит  деление,   путём  эндодиогении  или  полиэндогении,  или  путём  шизогонии нам    установить  не  удадось.  Однако точно  прослежено,  что после  деления,  паразиты не покидают материнскую клетку (спорозоит). Поэтому под общей материнской оболочкой токсоплазмы размножаясь, образуют большие колонии. По мере увеличения числа паразитов в колонии, материнская оболочка спорозоита преобразуется в оболочку тканевой цисты. При этом сарколемма мышечного волокна никакого участия в формировании цистной оболочки не принемает.

 

ОБРАЗОВАНИЕ ТКАНЕВЫХ ЦИСТ САРКОСПОРИДИЙ

В ОРГАНИЗМЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

По мерее изучения патоморфологии внезапной смерти крупного рогатого скота в Восточных провинциях республики Куба, в период с 1979 по 1982 год, автором параллельно проводился сбор материала для изучения морфологии и развития саркоспоридий в скелетных мышцах и миокарде животных. Собранный фактический материал от спонтанно заразившихся животных саркоспоридиями представляет определённый интерес в плане сравнительного сопоставления образования тканевых цист токсоплазмид. Для гистологического исследования паразитических простейших рода Sarcocystis материал (ягодичные мышцы, мышцы диафрагмы, язык и миокард) был взят от пяти животных породы зебу при убое здорового скота на Гаванском мясокомбинате в 1981 году. На мясокомбинат животные были доставлены из провинции Гавана. Материал от 11 животных этой же породы был взят в провинции Баямо и Лас – Тунас. Все 11 животных пали от «внезапной смерти», вызванной недостаточностью сердечной деятельности.        При патоморфологическом изучении скелетных мышц и миокарда здоровых животных и материала взятого от павших животных, нами было прослежено два способа образования тканевых цист саркоспоридий. У животных убитых в Гаванском мясокомбинате, развитие и размножение цист Sarcocystis, в основном, наблюдалось внутри мышечных волокон скелетной мускулатуры и миокарда, а у животных павших от «внезапной смерти», паразиты размножались и развивались, как правило, внеклеточно, образуя характерные тканевые цисты.

ВНУТРИКЛЕТОЧНОЕ ОБРАЗОВАНИЕ ТКАНЕВЫХ ЦИСТ

Sarcocystis sp.

При гистологическом исследовании скелетных мышц и миокарда животных убитых в Гаванском мясокомбинате обнаруживалось большое количество цист паразитов находящихся на разных стадиях их развития и формирования. У отдельных животных, в одном поле зрения микроскопа при малом увеличении можно было видеть до 20 – 22 цист. Несмотря на множество цист в миокарде животных, выраженной клеточной или дистрофической реакции со стороны миокарда на наблюдалось. По морфологическому строению цисты были не одинаковы. Большая часть из них имела тонкую оболочку и морфологически она (оболочка) была сходна со стенкой цист Toxoplasma gondii. Меньшая же часть цист, имела довольно толстую оболочку и морфологически была сходна с оболочками цист Besnoitia besnoiti (Фото 1).

 

Фото 1. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. Показано большое количество тканевых цист паразитов рода Sarcocystis в миокарде правого желудочка. Цисты окрашены базофильно. Окр. Гематоксилин - эозином,

При исследовании скелетных мышцах, раздавленных с помощью компрессория, хорошо можно было разглядеть общее строение цист и их расположение в мышечных волокнах. Сформированные цисты обычно обнаруживались в саркоплазме мышечных волокон и располагались вдоль волокна. Средние размеры их составляли в длину 600 – 700 микрон (иногда до одного миллиметра) и ширину до 400 – 500 микрон. Инвазированная часть мышечного волокна, как правило, была увеличена в объёме, сарколемма волокна незначительно утолщена и чётко контурированна. Цисты свободно располагались в саркоплазме мышечных волокон. Внутри колония разделена на септы (соты). Вокруг колонии паразитов хорошо просматривается тонкая или толстая оболочка, отделяющая паразитов от саркоплазмы мышечных волокон. И самое главное, что необходимо особо подчеркнуть - во всех колониях (цистах) саркоспоридий имеется два противоположных полюса. На одном из полюсов, назовём его «полюсом размножения», наблюдается интенсивное размножение паразитов и инфильтрация их в саркоплазму мышечных волокн. На этом полюсе, цистная оболочка отсутствует. На противоположном полюсе колонии (цисты), назовём его «полюсом формирования оболочки» видна хорошо сформированная оболочка (Фото 2).

Фото 2. Показан общий вид тонкостенной цисты саркоспоридий в мышечном волокне скелетной мышцы зебу. Препарат приготовленный (раздавленный) с помощью компрессория. Хорошо видно, что циста находится внутри саркоплазмы увеличенного в объёме мышечного волокна. На «полюсе размножения» оболочка цисты отсутствует . На противоположном полюсе видна хорошо сформированная оболочка цисты.

Особенностью  цист паразитических простейших рода Sarcocystis в скелетных мышцах и миокарде, является то, что колонии паразитов не являются цистами в том понимании, какое мы вкладываем в понятие цист размножения у Toxoplasma gondii, Besnoitia besnoiti или Neosporum canis. У перечисленных паразитов, цисты размножения представляют собой, более или менее, сферические (округлой формы) колонии, вокруг которых формируется замкнутая оболочка. И по мере размножения брадизоитов внутри колонии, сферическая форма цисты всегда сохраняется. У простейших же рода Sarcocystis, оболочка начинает формироваться только на одном полюсе и затем, по мере увеличения числа паразитов в колонии, она формируется  вдоль колонии, приближаясь к «полюсу размножения». На полюсе размножения оболочки нет, поэтому мерозоиты имеют возможность инфильтрировать новые участки саркоплазмы мышечных волокон и бесконечно долго размножаться в них, образуя огромных размеров колонии. Если рассматривать колонии брадизоитов рода Sarcocystis в гистологических препаратах, срезы которых прошли поперёк колонии, то действительно можно увидеть, что цисты саркоспоридий, в какой то мере сходны с цистами других токсоплазмид. Однако у саркоспоридий хорошо видно, что цисты находятся внутри мышечных волокон и вокруг них чётко просматривается ободок цитоплазмы.  В гистологических препаратах, приготовленных из скелетных мышц, можно проследить не только общею структуру формирующихся цист, но и формирование их оболочек. Особенно это хорошо видно при исследовании развития цист Sarcocystis с толстыми оболочками (Фото 3).

Фото 3. Продольный гистологический срез мышечного волокна и цисты с толстой оболочкой саркосоридий в скелетной мышце двухлетнего быка. Показан «полюс размножения» цисты (стрелка) и формирование цистной стенки из гомогенной, базофильной массы образовавшейся в результате гомогенизации(гидролизации) саркоплазмы мышечного волокна. От внутренней оболочки цисты, внутрь цисты отходят мембраны (каналы) делящие колонию на соты (показано стрелками). Окраска железным гематоксилином и эозином.

Просматривая несколько полей зрения гистологического препарата, особенно препаратов приготовленных из диафрагмы и миокарда правого желудочка, можно увидеть, что паразиты находятся на разных стадиях размножения и формирования тканевых цист. Даже в одном поле зрения микроскопа, встречались участки, где в одном мышечном волокне обнаруживался метроцит, приступающий к делению, в другом видна колония паразитов без наружной оболочки и в третьем - хорошо сформированная тонкостенная циста (Фото 4).

Фото 4. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. В одном поле зрения микроскопа видны разные фазы формирования тканевых цист Sarcocystis. В правом углу фотографии, показан метроцит, в самом начале своего размножения. Вокруг метроцита видна небольшая базофильная зона гомогенизированного мышечного волокна. В нижней части фотографии видна группа паразитов, вокруг которых оболочка цисты ещё не сформировалась. В верхнем левом углу фотографии видна циста с хорошо сформированной оболочкой. Окр. Гематоксилин – еозином. ув.

В самых начальных фазах размножения и развития метроцитов Sarcocystis, в мышечном волокне хорошо видно, что вокруг делящегося паразита, так же как и вокруг ядерной псевдоцисты Besnoitia besnoiti, образуется зона гомогенизированной (гидролизированной) саркоплазмы. При окраске гематоксилин - эозином гидролизированная саркоплазма окрашивается базофильно. При окраске по Браше она даёт резко положительную реакцию, что свидетельствует о содержании в ней большого количества РНК (Фото 5).

Фото 5. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. В саркоплазме мышечного волокна виден делящийся метроцит, вокруг которого просматривается зона гомогенизированной саркрплазмы окрашенной базофильно. Окр. Гематоксилин – эозином.

Отличием гомогенизированной саркоплазмы мышечного волокна расположенной вокруг метроцитов Sarcocystis, от гомогенизированной окружающей ткани образующейся вокруг ядерных псевдоцист Besnoitia besnoiti заключается в том, что гомогенизированная саркоплазма даёт резко положительную реакцию по Браше. В то время как гомогенизированная масса вокруг безноитиозных псевдоцист, хотя и содержит РНК, но всё же в ней преобладают нейтральные мукополисахариды (Фото 6 -7).

Фото 6. Гистологический срез миокарда зебу. Показана резко положительная реакция Браше (на РНК) цитоплазмы паразитов. Внутренний слой цистной оболочки и внутрицистные септы(перегородки) так же дают положительную реакцию на РНК. Окраска по Браше.

Фото 7. Гистологический срез дермы бычка при спонтанном безноитиозе. Показана гомогенная масса вокруг ядерных псевдоцист, дающая положительную реакцию на нейтральные мукополисахариды (показано стрелками). Окраска по Мак – Манусу.

Брадизоиты цист Sarcocystis и гомогенизированная саркрплазма, при окраске на нейтральные мукополисахариды дают негативную реакцию. Цитоплазма паразитов, расположенных в цистах, окрашивается по Мак - Манусу в сине – зелёный цвет. Ядра брадизоитов, как правило, находятся в центре паразитарной клетки. Однако встречаются паразиты в цисте и с ядрами сдвинутыми к тупому краю клетки (Фото 8 - 9).

 

Фото 8. Гистологический срез скелетной мышцы зебу. Показан поперечный срез тонкостенной цисты саркоспоридий. Реакция цитоплазмы паразитов на нейтральные мукополисахариды негативная, саркоплазма мышечных волокон даёт положительную реакцию на мукополисахариды. Окр. По Мак – Манусу.

 

Фото 9. Гистологический срез скелетной мышцы зебу. Показан поперечный срез тонкостенной цисты саркоспоридий окрашенный метиленовым синим. Хорошо видны брадизоиты с центральным и перифирическим расположением ядер.

На поперечных срезах мышечных волокон и цист саркоспоридий, хорошо прослеживается формирование оболочек вокруг колонии паразитов расположенной внутри мышечного волокна. При образовании толстостенных оболочек у Sarcocystis, процесс формирования их сходен с таковым у Besnoitia besnoiti, когда ядерная оболочка инвазированной клетки не разрывается, а становится внутренней оболочкой цисты. Только у Sarcocystis внутренней мембраной стенки цисты является материнская оболочка метроцита, тогда как при формировании цист Besnoitia besnoiti , внутренней мембраной отделяющей колонию паразитов от «питательного слоя» является изменённая (растянутая) оболочка инвазированного ядра.

За внутренней мембраной формирующейся цисты Sarcocystis идёт широкий (питательный) слой, сформировавшийся из гомогенизированной базофильной массы. И отделяет колонию паразитов от саркоплазмы мышечного волокна тонкая мембрана, сформированная тоже из гомогенной массы. При этом хорошо прослеживается, что сарколемма мышечного волокна никакого участия в формировании оболочек цист Sarcocystis не принимает (Фото 10 - 11).

Фото 10. Гистологический срез миокарда зебу. На фотографии показаны две формирующиеся цисты в саркоплазме мышечных волокон. Слева на фотографии видна небольшая колония паразитов с широкой оболочкой и двумя мембранами – внутренняя отделяет делящихся паразитов от широкого базофильного слоя и наружная отделяет широкий базофильный слой от изменённой (гидролизированной) саркоплазмы мышечного волокна. Гидролизированная саркоплазма вокруг колонии паразитов окрашена интенсивно эозином. Справа, показана колония паразитов, в которой видно большое количество  паразитов окрашивающихся базофильно. Вокруг колонии, базофильный слой оболочки цисты сохранен, а гомогенизированная саркоплазма мышечного волокна сдавлена и представляет собой небольшой эозинофильный ободок. Окр.железным гематоксилином и еозином.

 

 

Фото 11. Гистологический срез миокарда левого желудочка зебу. Гистосрез имеет незначительный артефакт  вызванный приготовлением препарата. Однако на препарате хорошо виден поперечный срез толстостенной цисты Sarcocystis, где можно различить колонию паразитов, разделённую септами и толстостенную цистную оболочку с внутренней и наружной мембранами. Окр. Гематоксилин – еозином.

По мере деления паразитов внутри колонии и увеличения их числа, саркоплазма мышечного волокна сдавливается паразитами до такой степени, что бывает трудно различить, где наружная мембрана цисты, а где сарколемма мышечного волокна. При этом в саркоплазме инвазированных мышечных волокон отмечается два патоморфологических процесса. Один связан с гидролизом саркоплазмы и полной потерей структуры миофибрил, что морфологически проявляется исчезновением поперечной и продольной исчерчености и превращением саркоплазмы в гомогенную беструктурную массу; второй связан со сдавливанием гидролизированной саркоплазмы(атрофией от давления). В цисте паразиты беспрерывно размножаются, при этом отмечается заметное уменьшение толстого базофильного слоя стенки цисты. В таких случаях создаётся впечатление, что сарколемма является как бы наружным слоем цистной стенки (Фото 12).

 

Фото 12. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. Показаны три колонии саркоспоридий на поперечных срезах цист. В цисте расположенной внизу справа базофильный слой ещё хорошо просматривается, в средней и верхней цисте базофильный слой истончён. Создаётся впечатление, что у этих цист наружным слоем является сарколема мышечного волокна. Окр. Железным гематоксилином и еозином.

Превращение саркоплазмы в гомогенизированную массу, хорошо прослеживается на препаратах, приготовленных из скелетных мышц, срез которых прошёл вдоль волокна. В инвазированных волокнах чётко различается сарколема мышечного волокна, колония паразитов и саркоплазма потерявшая свою поперечную и продольную исчерченность. Волокна, в которых формируются цисты саркоспоридий, резко отличаются от соседних, неинвазированных волокон, своей бледной окраской и гомогенной структурой (Фото 13).

Фото 13. Продольный гистологический срез скелетной мышцы зебу. Показана большая колония паразитов (циста) внутри мышечного волокна, с хорошо сформированной тонкой цистной оболочкой. Саркоплазма инвазированного волокна превращена в гомогенную массу (Показано стрелкой). Сарколема при этом хорошо сохранена и базофильно окрашена (Показано двумя стрелками). Окраска гематоксилин – еозином.

При увеличении колонии в размере, внутреннее содержимое (гомогенная масса) волокна сдавливается на всём протяжении инвазированного волокна и оболочка цисты тесно прижимается к сарколеме волокна и становится, практически, не различима. Оболочку цисты хорошо можно видеть только на одном из полюсов цисты (Фото 14).

Фото 14. Продольный гистологический срез скелетной мышцы зебу. Показана колония паразитов внутри гомогенизированного мышечного волокна. Паразитарная мембрана чётко просматривается только в участке волокна граничащегося с гомоенизированной саркоплазмой (Показано стрелкой). Окраска гематоксилин – еозином.

Паразиты рода Sarcocystis способны размножаться не только в мышечных волокнах миокарда, но и в нервных волокнах, проходящих в интерстициальной ткани. Как и в мышечных волокнах, мерозоиты проникшие в нервные волокна, вначале вызывают гомогенизацию (гидролиз) участка нервного волокна, окружающего паразита. А затем в нервном волокне формируют полноценные цисты размножения (Фото 15).

 

Фото 15. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. Показаны хорошо сформированные цисты саркоспоридий в мышечных волокнах  и в нервном волокне (Стрелка). Окр. Гематоксилин – еозином.

Образование тонкостенных цист Sarcocystis в нервных волокнах миокарда сходно с формированием цист Toxoplasma gondii в головном мозге экспериментальных животных (Подробное описание этого процесса смотри в статье «ТОКСОПЛАЗМОЗ» Новый взгляд на старую проблему. Журнал « Новые медицинские технологии» № 4 -5, 2005 год). Размножение саркоспоридий в нервных волокнах миокарда отличается от такового в мышечных волокнах тех же животных тем, что проникшие в нервное волокно паразиты делятся как бы внеклеточно. Общая материнская капсула при этом отсутствует. Проникшие в нервные волокна мерозоиты размножаются, и когда образуется большая колония паразитов начинает формироваться оболочка (Фото 16, 17, 18).

 

Фото 16. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. В нервном волокне видна свободно располагающая колония саркоспоридий, оболочка вокруг колонии ещё отсутствует. Окр. Гематоксилин - эозином.

Фото 17. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. В нервном волокне миокарда показана большая колония саркоспоридий. Границы колонии ещё не чётко контурированы и лишь местами просматривается тонкостенная оболочка (показано стрелкой). Окр. Гематоксилин - эозином.

При окраске препаратов по Браше цитоплазма саркоспоридий  в цистах  обнаруживаемых в нервных волокнах, так же, как и цистах формирующихся в мышечных волокнах, дают резко положительную реакцию (Фото 18).

 

Фото 18. На фотографии показан гистологический срез миокарда зебу. Видна резко положительная реакция Браше в брадизоитах цисты саркоспоридий расположенной в нервном волокне (Показано стрелкой). Окр. По Браше.

Таким  образом, анализ  гистологического  и  гистохимического  исследования  скелетных  мышц и  миокарда крупного  рогатого  скота  породы  зубу показал,  что  в  мышцах  встречаются  цисты  двух  типов – одни  с  тонкими  оболочками  и  вторые  с  толстыми.  Способ образования   тонкостенных  цист сходен  с  образованием  цист  размножения  у T.gondii. Формирование  толстостенных  цист,  практически, аналогичен  образованию  тканевых  цист B.besnoitia. Различие  состоит  лишь  в  том,  что цисты,  например,  токсоплазм,  наряду  с  тем,  что  образуются  в  мышечных  волокнах скелетных  мышц  и миокарда, большей частью встречаются  в  головном  мозге и только внеклеточно.  А  тканевые  цисты B.besnoitia в  коже,  семенниках,  слизистой  оболочке  влагалища и  конъюнктиве.

Механизм  образования  тканевых  цист  паразитических  простейших T.gondii, B.besnoitia и Sarcocystis,  практически,  идентичен.

ВНЕКЛЕТОЧНОЕ  ОБРАЗОВАНИЕ ЦИСТ Sarcocystis

В 70 – 80 годы прошлого столетия в отдельных зонах Восточных провинций Кубы было широко распространено заболевание крупного рогатого скота неизвестной этиологии, называемое местными врачами Muerta subita. На русский язык это название переводится как «Внезапная смерть». Характерной особенностью этого заболевания является то, что оно встречается только в отдельных прибрежных зонах Карибского моря и Атлантического океана. Такие территории занимают строго ограниченные, относительно небольшие участки пастбищ. Они хорошо известны ветеринарным специалистам Кубы. Достаточно в неблагополучную зону ввести здоровое стадо крупного рогатого скота и выпасать животных в ней (без дополнительных подкормок) 30 - 40 суток, как начинаются видимые проявления заболевания. Клинически болезнь характеризуется тем, что животные заметно теряют в весе, за счёт дистрофии и атрофии скелетной мускулатуры. Но самая главная особенност этой болезни проявляется тем, что при повышении даже незначительной физической нагрузки, животные тут же могут погибнуть. Даже незначительный активный прогон по местности или внезапный испуг мог привести к гибели значительного числа животных. Отсюда и название этого заболевания - Внезапная смерть. Через два - три месяца нахождения животных в таких зонах отмечалась их крайняя степень истощения, связанная с общей атрофией скелетных мышц и жировой клетчатки,  а  так  же  ценкеровским  некрозом в  скелентых  мышцах. Наиболее часто смерть при физической нагрузке отмечалась у телят до 7 месяцев и животных до двух лет. Клиническая картина проявлялась шаткостью походки, парезами и параличами конечностей и мышц шеи. Важно отметить, что при появлении даже первых признаков заболевания, спасти животное никакими методами лечения никому не удавалось. При патологоанатомическом вскрытии павших животных основные патоморфологические изменения выявлялись в скелетных мышцах и миокарде. Со стороны скелетной мускулатуры отмечалась общая атрофия, а в массивных группах мышц - мышц тазовых конечностей и шеи - ценкеровский некроз мышечных волокон.

При гистологическом исследовании скелетных мышц и миокарда у павших животных, обнаруживалось большое количество цист саркоспоридий с толстыми и тонкими оболочками. Можно было видеть большое количество колоний саркоспоридий, паразиты которых размножались не только в саркоплазме мышечных волокон, но и в интерстициальной ткани. Нередко, при формировании цист, паразиты использовали несколько атрофированных мышечных волокон, предварительно превратив их в гомогенную бесструктурную массу (Фото 20).

 

Фото 19. Гистологический срез миокарда бычка в возрасте 11 месяцев, породы зебу павшего в провинции Баямо, Республика  Куба. Показан продольный чрез пучка атрофированных мышечных волокон миокарда, в котором видно размножение и формирование цисты саркоспоридий в гомогенизированной массе. Хорошо виден «полюс размножения) и «полюс формирования оболочки» колонии (показано стрелками) . Окраска по Ван – Гизону.

При таком (внеклеточном) образовании цист, так же как и при внутриклеточном, в колонии саркоспоридий чётко выявляется два полюса – «полюс размножения» и «полюс формирования» оболочки цист. На «полюсе размножения», хорошо видно как мерозоиты саркоспоридий, инфильтрируют группу атрофированных мышечных волокон превращая их в гомогенную, бесформенную массу. При этом гидролизу подвергается не только саркоплазма мышеных волокон, но и их сарколемма и ядра. На противоположном полюсе – «полюсе формирования оболочки цисты» можно видеть уже хорошо сформированную оболочку. Как и у Besnoitia besnoiti оболочка цисты формируется самими паразитами. Ткани организма хозяина никакого участия в этом процессе не принимают (Фото 20).

 

Фото 20. Гистологический срез скелетной мышцы 14 месячного бычка павшего от «внезапной смерти». Показан продольный срез атрофированной мышцы с формирующейся в ней цистой. На фотографии хорошо видно два полюса колонии саркоспоридий. На «полюсе размножения» морфологические формы паразитов свидетельствуют об интенсивном их размножении и инфильтрации группы мышечных волокон, тогда как на противоположном полюсе и вдоль большей части колонии, хорошо видна тонкостенная оболочка. Окр. Гематоксилин – еозином.

Сравнительный анализ обнаруженных морфологических структур паразитов даёт основание заключить, что при тотальной атрофии мышечных волокон, образованию тканевых цист саркоспоридий предшествует гомогенизация (гидролиз) не только мышечных волокон, но и окружающей ткани, вокруг проникших в скелетную мускулатуру или миокард паразитов. Этот процесс очень похож на таковой в дерме крупного рогатого скота при безноитиозе (Фото 21).

 

Фото 21. Гистологический срез миокарда бычка породы зебу, в возрасте 9 месяцев погибшего от «внезапной смерти». Показана начальная фаза формирования колонии саркоспоридий не в мышечной, а в соединительной (интерстициальной) ткани миокарда. В гомогенизированной массе видно несколько метроцитов находящихся на разных стадиях деления. Стрелкой показаны шизонты распадающийся на мерозоиты. Окраска по Ван – Гизону.

Распавшиеся шизонты в гомогенной массе образуют свои обособленные группы мерозоитов, которые отделяются друг от друга гомогенной массой. При дальнейшем размножении мерозоитов в колонии, гомогенная масса сдавливается и между ними остаются лишь небольшие её прослойки. При окраске гистологических препаратов по Ван – Гизону гомогенная масса окрашивается в тёмно коричневый цвет, а при окраске гематоксилин – эозином, в различные оттенки розового цвета (Фото 22).

 

Фото 22. Гистологический срез миокарда бычка, породы зебу, в возрасте 11 месяцев. Показано формирование цисты саркоспоридий в интерстициальной ткани миокарда. В гомогенизированной массе видны группы мерозоитов разделённых гомогенной эозинофильной массой. Вокруг колонии паразитов хорошо просматривается тонкая оболочка. Окр. Гематоксилин – еозином.

После распада шизонтов на мерозоиты и дальнейшего их деления, в гомогенизированной массе миокарда и скелетных мышцах, можно видеть колонии паразитов, свободно располагающихся в гомогенной массе. Вокруг небольших колоний, как правило, оболочка отсутствуют. И только позже, при образовании в колонии значительного количества паразитов, у одного из полюсов колонии начинает формироваться оболочка. Тогда как на противоположном полюсе (полюсе размножения) просматривается активное деление паразитов. Паразиты находящиеся во внеклеточных колониях, так же как и в саркоплазме мышечных волокон дают резко положительную реакцию по Браше (Фото 23).

 

 

Фото 23. Гистологический срез атрофированной скелетной мышцы. Окраска по Браше. Показана резко положительная реакция цитоплазмы паразитов на РНК.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО РАЗДЕЛУ

Таким образом, анализ  данных  литературы  и данные  наших  исследований показывают,  что  в образовании цист саркоспоридий и других токсоплазмид есть много общего. Первое сходство состоит в том, что тканевые цисты саркоспоридий, так же как и цисты Toxoplasma gondii, Besnoitia besnoiti и по – видимому, Neosporum caninum, являются продуктом колониального размножения и развития паразитов. Паразиты этой группы имеют общий план формирования цист. Перед формированием их, паразиты, будучи внутри - или вне клеток, способны гидролизировать любую ткань организма хозяина, превращая её в гомогенную бесструктурную, слизистую массу, которая является питательным субстратом для колоний паразитов. Даже если циста формируется внутри ядра гистиоцита (B. besnoiti) или саркоплазме мышечного волокна (Sarcocystis), фактически, речь идёт о внеклеточном их формировании. Поскольку ни от инвазированного безноитиями гистиоцита, ни от инвазированного саркоспоридиями мышечного волокна ничего не остаётся, кроме растянутой, структурно изменённой ядерной оболочки гистиоцита и сарколеммы мышечного волокна. Практически, размножение паразитов, их питание и развитие происходит в гидролизированных клетках  и  тканях.

Отличительной особенностью цист саркоспоридий от других токсоплазмид является их чётко выраженная морфологическая и функциональная полярность. На одном полюсе формирующейся цисты, паразиты активно размножаются, на другом – мерозоиты формируют оболочку цисты. На «полюсе размножения» оболочка отсутствует. Такая полярность и «специализация» мерозоитов внутри цист, даёт им возможность бесконечно долго размножаться внутри мышечного волокна или внеклеточно, образуя больших размеров, вытянутые в длину тысячные колонии мерозоитов. В действительности же  такие колонии только условно можно называть цистами. Поскольку термин «паразитарная тканевая циста размножения» означает сферическое или овальное образование, типа  кокана, с беспрерывной вокруг оболочкой, внутренняя полость которого заполнена паразитами. У паразитов рода Sarcocystis «полюс размножения» как правило не имеет оболочки.   Размножаясь,  саркоспоридии  могут  образовывать  колонии   состоящие  из  тысяч  брадизоитов,  достигающих  в  длину  нескольких  сантиметров,  видимых  невооруженным  глазом. При  этом,  в  процессе  развития  и  размножения,  саркоспоридии инвазируют  не  одно  мышечное  волокно  скелетной  мышцы  или  миокарда,  а  несколько. Поэтому  говорить строго о внутриклеточном  размножении  саркоспоридий  при  образовании тканевых  цист   можно  лишь  условно.

Вторым важным отличием цист саркоспоридий от Toxoplasma gondii и Besnoitia besnoiti является биохимический обмен мерозоитов находящихся в цистах. Мерозоиты саркоспоридий в своей цитоплазме, практически, не содержат амилопектина (нейтральных мукополисахаридов), в то же время в их цитоплазме выявляется большое количество РНК и общего белка. У T. gondii и B. besnoiti по мере формирования цист в цитоплазме брадизоитов уменьшается количество РНК и общего белка, тогда как количество амилопектина увеличивается и у хорошо сформированных цистах, большую часть цитоплазмы брадизоитов занимают гранулы амилопектина.

Долгое время не ясно было, каким образом происходит поступление и питание тысяч брадизоитов находящихся внутри цисты токсоплазм, да и вообще обмен веществ в колонии паразитов. Чтобы более или менее понять метаболизм внеклеточного развития и размножения токсоплазмид и в частности B.bеsnoiti, необходимо вспомнить, что внутриклеточная паразитофорная вакуоль «строится» паразитом за счёт материала инвазированной клетки  хозяина для: с одной стороны, чтобы изолировать себя от агрессивных ферментов клетки, поскольку  токсоплазмиды  приспособились  размножаться  в  самой  агрессивной  среде  организма  хозяина – это в  лейкоцитах  и  клетках РЭС; с другой - паразитофорная вакуоль служит местом, где под воздействием ферментов паразита происходит превращение (гидролиз) питательных веществ инвазированной клетки в низкомолекулярные строительные блоки, из которых паразит синтезирует уже свои органические и неорганические вещества - нуклеиновые кислоты, белки, жиры, углеводы ит.д.

По сходному плану происходит образование питательной зоны и при внеклеточном колониальном развитии токсоплазмид. Также путём гидролиза окружающих клеток и межклеточного вещества, колония паразитов образует питательную зону, своеобразную паразитофорную вакуоль, но уже не для одного паразита проникшего внутрь клетки, а для всей внеклеточной колонии. Процессы «строительства» колониальной паразитофорной вакуоли у каждого вида токсоплазмид хотя и отличаются друг от друга, но в принципе формируются по сходному плану. Как было показано выше, наиболее демонстративно и морфологически и цитохимически процессы формирования питательной зоны выражены у B.bеsnoiti. Гистохимические исследования, проведённые Л.А. Бугаевай (1974) показали, что внеклеточные токсоплазмы тоже, вначале, подвергают гидролизу белое вещество головного мозга, а затем из гомогенизированной слизистой массы богатой нейтральными мукополисахаридами «строят» цистную оболочку. По сравнению с B.bеsnoiti оболочка цисты токсоплазм гораздо тоньше и в ней нет такой питательной зоны, которая формируется вокруг колонии безноитий. Однако,  как  показал  в  своих  исследованиях профессор  J. K. Beverley (1969) изучавший ультраструктуру стенки цист токсоплазм,  оболочка цист пронизана множеством канальцев  соединяющих  колонию  паразитов  с  окружающей  тканью. Эти канальцы, по мнению автора, и обеспечивают интенсивный обмен между организмом хозяина и тысячной  колонией паразитов. Выводы И.К. Беверли согласуются с данными, которые получила Т.В.Бейер (1978), при цитохимическом изучении цист токсоплазм. Она наблюдала, что ткань мозга белых мышей окружающая цисту «неизменно демонстрировала интесивную активность кислой и щелочной фасфатаз, а так же тиаминпироффосфатазы». Кроме того, Т.В. Бейер обнаружила интенсивный слой белка в ткани головного мозга мыши расположенного в непосредственной близости к цистам токсоплазм. В связи с этим, Т.В. Бейер рассматривает прицистный слой, как ответную реакцию ткани хозяина на присутствие белкового тела, т. е. цисты токсоплазм. Однако, что это за ответная реакция организма хозяина Т.В.Бейер не объясняет. Л.А. Бугаева(1974) проводя гистохимические исследования тканевых цист токсоплазм у экспериметально заражённых белых мышей, также наблюдала вокруг цист токсоплазм гомогенную прицистную зону, дающую резко положительную реакцию на нейтральные мукополисахариды и общие белки с бром – феноловым синим. При окраске препаратов по Браше прицистная зона давала также слабую пиронинофилию. Однако, в те годы, до изучения образования  тканевых  цист  у B.bеsnoiti, как и Т.В. Бейер, мы не смогли понять и объяснить назначение прицистной зоны у тканевых цист токсоплазм.

В настоящее время, после морфологического и гистохимического исследования разных стадий размножения и развития B.bеsnoiti, назначение прицистной зоны у токсоплазм можно объяснить тем, что как и безноитии, токсоплазмы для внеклеточного колониального размножения и развития, путём гидролиза белого вещества мозга, формируют питательную зону, своеобразную колониальную паразитофорную вакуоль, только не в самой стенке цисты, а вокруг неё (цисты). В связи с этим, очень важно вспомнить, вывод который ещё в 1969 году сделал профессор J. K. Beverley – «образование цист токсоплазм не зависит от иммунного состояния макроорганизма, а является закономерной фазой жизненного цикла токсоплазм». На основании проведённого нами патоморфологического, гистологического и гистохимического исследований, мы также можем сказать, что вывод сделанный J. K. Beverley в отношении токсоплазм вполне применим и к B.bеsnoiti. Образование тканевых цист и образование ядерных псевдоцист, является нормальной, закономерной фазой жизненного цикла B. bеsnoiti и не зависит от иммунного состояния организма хозяина.

У саркоспоридий образование питательной зоны отличается от таковой токсоплазм и безноитий, поскольку формируется, в большинстве случаев, в саркоплазме мышечного волокна. Практически, всё  мышечное  волокно гидролизуется и превращается  в гомогенную  бесструктурную питательную для  паразитов массу. В тех же случаях, когда цисты саркоспоридий образуются внеклеточно, из нескольких мышесных волокон, то формирование питательной зоны аналогично таковой у токсоплазм  и  безноитий.

Следует особо подчеркнуть, что у саркоспоридий при формировании цист, демонстративнее прослеживается «специализация» паразитов. Если у B. bеsnoiti размножающиеся паразиты находятся в центре колонии, а «ответственные» за формирование внутренней оболочки, по периферии, то у саркоспоридй размножающиеся мерозоиты и мерозоиты «ответственные» за формирование внутренней мембраны оболочки цисты находятся по полюсам. Поэтому у B. bеsnoiti размер и форма цист ограничивается оболочкой, формирующейся по периферии (периметру) колонии и имеют круглую форму. У саркоспоридій же размножение мерозоитов происходит на одном из свободных полюсов колонии (полюсе размножения). Этот полюс не ограничен оболочкой  паразитов, что даёт колонии размножаться вдоль волокна, практически, бесконечно. Формирование общей оболочки начинается с противоположного полюса колонии и идёт вслед за размножающимися мерозоитами. В связи с этим цисты саркоспоридий имеют продолговато - овальную форму, иногда достигают огромных размеров видимых даже невооруженным глазом.

В отношении неоспор достоверных сведений о их размножении в организме хозяина и формировании тканевых цист накоплено крайне мало  данных, чтобы сделать определённые выводы. Однако то, что уже опубликовано, свидетельствует о том, что жизненный цикл неоспор и эндогенное размножение паразитов очень сходное с жизненным циклом токсоплазмам.

ОБСУЖДЕНИЕ

Важным моментом в паразито- хозяинных отношениях токсоплазмид с организмом хозяина, является способность их размножаться в белых элементах крови и клетках РЭС. В природе обнаружено небольшое количество паразитических простейших, которые в процессе эволюции, не только смогли адаптироваться к этим клеткам, но и активизировать их биохимический обмен для удовлетворения своих потребностей. Способность размножаться в лейкоцитах крови и клетках РЭС, в какой то мере, сближает безноитий  токсоплазм, саркоспоридий и неоспор с гемоспоридиями и пироплазмидами (тейлериями).

И.Г. Галузо, в своей монографии «Жизненный цикл токсоплазм», выделяет у споровиков три типа развития:

Первый и наиболее изученный - кокцидийный. Он сводится к развитию паразитов в одной особи, одного вида хозяина - от спорозоита до ооцисты, а вернее от ооцисты до ооцисты. Такой тип развития называется однохозяинным и является характерным для эймерид или паразитов, которых в последние годы всё чаще называют «классическими кокцидиями». Единственным путём трансмиссии у таких паразитов является алиментарный путь. Единственной инвазионной стадией эймерий является спорулированная ооциста.

Второй тип и тоже хорошо изученный - это малярийный тип. Он сводится к развитию в организме двух особей разных видов хозяев: пролиферация (бесполое размножение) в организме позвоночного животного, половое и спорогония - в организме беспозвоночного (комара – переносчика, при малярии или клеща – переносчика, при гемаспоридиозах и пироплазмидозах). Особенностью этого типа развития является обязательная смена хозяев. Как позвоночное животное не может быть источником заражения для других позвоночных хозяев, так и комар или клещ не заражаются друг от друга. Исключение из этого правила составляют представители семейства Babesiidae. Паразиты этого семейства передаются трансовариально и могут циркулировать в организме беспозвоночных хозяев длительное время, переходя от одной генерации к другой через яйца клещей и их личинки.

И, наконец, третий тип развития, заметно отличающий от двух предыдущих, принадлежит токсоплазмам. Характерной его особенностью является не обязательная смена дефинитивного хозяина промежуточным. Отсутствует прямой путь размножения токсоплазм в кишечнике дефинитивного хозяина от изоспоры до изоспоры. При попадании изоспор токсоплазм в организм дефинитивного хозяина, спорозоиты должны пройти бесполую фазу развития во внутренних органах, и только после ряда делений, мерозоиты попав вновь в кишечник, могут дать начало половой фазе развития. Таким образом, одно и тоже животное является одновременно и дефинитивным, и промежуточным хозяином.

В организме промежуточных хозяев, которыми являются все млекопитающие и птицы, бесполое развитие и размножение (пролиферация) проходит беспрерывно, практически бесконечно. Оно может протекать, переходя от одного хозяина к другому без участия половой стадии развития и спорогонии. В то же время половая фаза развития от спорозоита до зигоцисты (ооцисты), в организме дефинитивного хозяина, может миновать промежуточного хозяина. В общем, в жизненном цикле токсоплазм совершенно не обязательна смена и чередование хозяев - дефенитивный - промежуточный - дефинитивный. В отличие от «классических кокцидий», у токсоплазм инвазионными являются все стадии их развития, за исключением гаметоцитов и неспорулированных зигоцист. Важной особенностью токсоплазм является возможность преодолевать плацентарной барьер и заражать плод в утробе матери, а также заражать изоспорами (ооцистами) другие виды животных при любом методе их введения – подкожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, в головной мозг и другие полости и ткани тела животных. Такого типа развития, пишет академик И.Г.Галузо, «мы не знаем ни у одного отряда споровиков». После изучения группой немецких учёных (Rommel et al.,1972 Heydorn,Rommel,1972 Rommel,Heydoron,1972) жизненного цикла саркоспоридий и французских (Landau et al.,1970,1972) гемогрегарин, можно выделить ещё и четвёртый тип развития споровиков – это саркоспоридиозный или аделеидный (гемогрегаридный). Он характеризуется тем, что в фазу размножения в организме промежуточных хозяев, он сходен с токсоплазмозным типом. Так же как и токсоплазмы, трофозоиты саркоспоридий, и гемогрегарин являются паразитами клеток лейкоцитов крови и ретикуло – эндотелиальной системы, в которых они проходят фазу бесполого размножения и развития. В организме промежуточных хозяев, бесполое размножение саркоспоридий и гемогрегарин завершающается формированием гаметоцитов. Последние попав в организм дефинитивного хозяина, сразу же, без прогамного деления, дают начало микрогаметоцитам и макрогаметоцитам. Общим для этих паразитов является и то, что половой процесс и споруляция проходит не во внешней среде, как у эймерий, токсоплазм и неоспор, а в организме дефинитивных хозяев. Для саркоспоридиозного типа развития, как и для малярийного, характерна обязательная смена хозяев – дефинитивный - промежуточный - дефинитивный. Однако в саркоспоридиозном типе развития, трансмиссия паразитов от животного к животному осуществляется по схеме - хищник - жертва. У саркоспоридий - это травоядные млекопитающие и хищники семейства псовых и кошачьих; у гемогрегарин - беспозвоночные хозяева, (пиявки, комары, клещи) выступают в роли жертвы, а позвоночный хозяин - это в основном, холоднокровные животные (лягушки, змеи, сухопутные и водные черепахи, рыбы) в роли хищника.

Мы специально привели вкратце эти четыре типа развития споровиков  приведённые  в  работе  И.Г.Галузо, чтобы путём сопоставления эндогенного размножения и циркуляции паразитов в природе показать, что B.bеsnoiti, с одной стороны имеют много общего с представителями приведённых типов, с другой - не повторяют ни один из них. В то же время, по морфологии трофозоитов и мерозоитов, эндогенному развитию и циркуляции в природе, B.bеsnoiti имеют заметное сходство с токсоплазмами, неоспорами, саркоспоридиями, гемогрегаринами и тейлериями при размножении их в организме промежуточных хозяев. Как и выше перечисленные паразиты, B.bеsnoiti на ранних стадиях своего развития в организме крупного рогатого скота являются паразитами белых элементов крови и клеток ретикуло – эндотелиальной системы. Как у токсоплазм, так и у безноитий инвазионными являются все стадии развития. В то же время, стадии псевдоцисты и цисты у токсоплазм и безноитий различаются по способу их образования и развития. Токсоплазмы проходят стадию псевдоцисты в цитоплазме клеток РЭС, а безноитии в их ядрах. При образовании тканевых цист, токсоплазмы формируют питательную зону (колониальную паразитофорную вакуоль) за пределами оболочки цисты, в прицистном слое, безноитии же формируют питательную зону в самой стенке оболочки цисты. Различаются токсоплазмы и безноитии так же и по способу передачи паразитов от животного к животному. Токсоплазмы могут передаваться от животного к животному и человеку всеми известными путями, но наиболее выраженный путь у них - это хищник - жертва (кошка - мышка). У безноитий, пока, достоверно установлено только два пути трансмиссии - механическая передача жалящими и кровососущими насекомыми и половым путём.

Таким образом, хотя хорошо прослеживается различие безноитий от токсоплазм в отдельных способах своего развития, по морфологии, биохимическому обмену, размножению и циркуляции в природе, у B.bеsnoiti больше сходства с токсоплазмозным типом развития. Что же касается паразитов размножающихся по кокцидийному типу, то B.bеsnoiti имеют сходство только в морфологическом строении трофозоитов и в способности образовывать вокруг себя внутриклеточную паразитофорную вакуоль. Эндогенный же цикл размножения и циркуляция в природе представителей семейства Eimeridae не имеет ничего общего с B.bеsnoiti. Поэтому, нам представляется, приведённых различий вполне достаточно, чтобы не относить безноитий крупного рогатого скота (B.bеsnoiti ) не только в семейство эймерид, но и в подкласс Coccidiomorpha. В связи с этим, возникает вопрос о месте B.bеsnoiti в системе простейших. И в этом, в какой – то мере, может помочь сравнительный анализ известного цикла B.bеsnoiti с другими паразитическими простейшими.

Если сравнивать жизненный цикл B.bеsnoiti с паразитами малярийного типа, то можно легко заметить, что некоторые стадии их развития очень сходны. Так, например, преэритроцитарные стадии размножения представителей семейства Theileriidae из отряда Piroplasmida (по классификации М.В.Крылова) и малярийного плазмодия из отряда (Haemosporidia) сходны с таковыми у B.bеsnoiti. Это сходство выражается прежде всего, в том, что безноитии, тейлерии, и малярийный плазмодий, в ранние стадии инвазионного процесса являются паразитами белых элементов крови и клеток ретикуло – эндотелиальной системы, в которых они размножаются и проходят бесполую фазу размножения. Сходная у них и электронно - микроскопическая структура. Однако после стадии размножения в лейкоцитах и клетках РЭС, мерозоиты тейлерий и малярийного плазмодия проникают в эритроциты позвоночного животного, где и завершают бесполую фазу своего размножения. B.bеsnoiti после фазы размножения в лейкоцитах крови и клетках РЭС , для  дальнейшего  поддержания  вида  в  природе  формируют тканевые цисты размножения.

Сходны и пути передачи B.bеsnoiti от животного к животному с тейлериями и малярийным плазмодием. Как у тейлерий и малярийного плазмодия трансмиссия идёт через клещей, комаров и других жалящих насекомых, так и у безноитий этот путь передачи является основным. Разница заключается лишь в том, что если для тейлерий и малярийного плазмодия клещи и комары являются дефинитивными хозяевами, то для безноитий крупного рогатого скота, они играют роль механических переносчиков. Одним  из  объединяющих факторов  B.bеsnoiti с пироплазмидами, гемоспоридиями, токсоплазмами и саркоспоридиями является способность этих паразитов развиваться и размножаться во внеклеточной среде. У тейлерий и гемоспоридий - это размножение паразитов в просвете кишечника беспозвоночных хозяев и гемолимфе, у токсоплазм и саркоспоридий - при образовании тканевых цист размножения. По мнению Т.В. Бейер и её соавторов (1978) у истинных кокцидий, внеклеточное развитие и размножение отсутствует и даже теоретически невозможно, в связи с тем, что: «… кокцидии с самого начала своего становления в качестве паразитических организмов приспособились к жизни за счёт органического пищевого и строительного субстрата, который они могут извлекать только из живой клетки благодаря наличию у них способности направленно изменять обмен веществ для собственного роста, а так же для построения тел многочисленного потомства паразита. …И далее … только активное взаимодействие с живой клеткой позволяет внутриклеточному паразиту извлекать максимальную пользу для своего существования. Но, научившись, создавать для себя внешнюю среду, паразит сам попал в зависимость от неё: развитие его в ином окружении стало невозможным». Выводы сделанные Т.В.Бейер и её соавторами, на основании тщательного морфологического, электронно – микроскопического и гистохимического изучения представителей семейства Eimeriidae, наглядно показывают, насколько глубоки различия «истенных кокцидий» и токсоплазмид не только в жизненных циклах этих паразитов, но в их метаболизме и паразитохозяинных отношениях.

Хотелось бы надеяться, что у специалистов ознакомившихся с представленным обзором, не возникало бы больше сомнений в том, что безноитии крупного рогатого скота (B.besnoiti) к «классическим» кокцидиям не имеют никакого отношения. В связи с этим, естественно, возникает два вопроса: первый – это вопрос о месте B.besnoiti в системе простейших и второй - вопрос эволюционного развития B.besnoiti.

Морфологические, цитологические, биохимические и электронно – микроскопические исследования проведённые в последние 40 лет убедительно показали, что трофозоиты B.besnoiti по своей морфологии и ультраструктуре сходны с трофозоитами токсоплазмам, неоспор, саркоспоридий, эймерий, гемоспоридий и пироплазм. Такое морфологическое и электронно - микроскопическое сходство, позволило Н.Д.Левайну в 1970 году в типе простейших(Protozoa) образовать подтип Apicomplexa и включить в него всех спорообразующих паразитов. Это решение было революционным в систематике простейших и многие паразитологи и систематики мира положительно отнеслись к появлению такого подтипа в системе простейших. Однако не все учёные с таким объединением соглашаются. Так, например, М. В. Крылов в своей монографии «Пироплазмиды» выпущенной в 1981 году пишет: «На наш взгляд, название подтипа выбрано неудачно – хотя бы потому, что органеллы, используемые для обоснования подтипа, не всегда локализуются на апикальном полюсе. Видимо, не имело смысла заменять прежнее хорошее название Sporozoa на Apicomplexa». Нам представляется образование подтипа Apicomplexa в царстве простейших, основанное на данных морфологических и особенно электронно - микроскопических исследований, своевременно и вполне обосновано. Оно показывает не только общность гомологичных структур паразитов этого подтипа, но и их цитохимическое и биохимическое сходство разных стадий эндогенного размножения и развития паразитов. Важно и то, что этот подтип сможет объединить не только спорообразующих паразитических простейших, но и паразитов у которых отсутствует половой процесс и спроргония и сходных по морфологическим признакам. Не исключено, что со временем, подтип Apicomplexa разделится на группу внутриклеточных паразитов, в жизненном цикле которых имеется половой процесс и споруляция и паразитов сходных по морфологическим признакам и жизненным циклам, но у которых нет полового процесса и споруляции. Первым кандидатом в эту группу и являются безноитии крупного рогатого скота (B.besnoiti), вторыми - токсоплазмы(T.gondii) и неоспоры.

Что касается нынешнего положения B.besnoiti в системе простейших, то до окончательного изучения жизненного цикла, правомерно было бы оставить их в классе споровиков (Sporozoa). Поскольку у B.besnoiti как и у других токсоплазмид, наряду со сходной морфологической и ультратонкой организацией, имеется чётко детерминированные фазы бесполого развития и размножения - фаза внутриклеточной пролиферации, которую паразиты проходят в лейкоцитах крови и клетках РЭС, и фаза внеклеточного колониального развития и размножения, завершающуюся образованием тканевых цист размножения. Кроме того, бесполый цикл размножения и развития, а так же циркуляция B.besnoiti в природе, имеет большое сходство с тейлериями (Theiria annulata) и малярийным плазмодием(Plasmodium vivax). Как у тейлерий и малярийного плазмодия имеются преэритроцитарные фазы развития и размножения в лейкоцитах и клетках РЭС, так и у B.besnoiti мы видим наличие этих стадий. Как у B.besnoiti, так и у пироплазмид и гемаспоридий в жизненном цикле паразитов имеются стадии внеклеточного размножения и развития. Наличие внеклеточного размножения у паразитических простейших имеет важное значение, при определении паразитов в системе простейших и их эволюции. М. В. Крылов(1981), например, считает, что паразиты, у которых в жизненном цикле развития имеются внеклеточные стадии размножения, в эволюционном плане, являются более примитивными организмами. К таким организмам он относит представителей отрядов Perkinsemorpha, Gregarinomorpha и Adeleida, у которых ранние стадии развития, паразиты проходят внутриклеточно, а поздние развиваются вне клеток организма хозяина. Автор считает, что в эволюционном плане более развитыми, среди Sporozoa являются паразиты отрядов Haemosporidia и Piroplasmidia.

Учитывая жизненный цикл токсоплазм и других токсоплазмид, включая и безноитий крупного рогатого скота (B.besnoiti), академик И.Г. Галузо (1974) выделил их в отдельный отряд (отряд Toxoplasmida) в классе споровиков, подкласса Coccidiomorpha. Дальнейшие исследования полностью подтвердили правомерность такого выделения. Сходного мнения придерживался и один из ведущих протозоологов ХХ столетия, основатель первой в СССР. лаборатории токсоплазмоза при Институте эпидемиологии и микробиологии имени Н.Ф. Гамалеи АМН СССР в Москве, профессор, Дмитрий Николаевич Засухин. В своей работе опубликованной совместно с Г.А. Акиншиной(1972), авторы пишут, что токсоплазмы заметно отличаются от «типичных» кокцидий множеством признаков. На этом основании они предложили выделить токсоплазмид (включая и B.besnoiti ) в самостоятельную систематическую единицу. В какую токсономическую единицу авторы не указали. Но в устных обсуждениях на совещаниях и семинарах по токсоплазмидам, которые проводились в конце 60 – х, начале 70 –х годов, практически, ежегодно в лаборатории токсоплазмоза в Москве или лаборатории токсоплазмоза в Алма -Ате, Дмитрий Николаевич Засухин категорически не был согласен с предложением отдельных исследователей поместить токсоплазмид, вместе с родом Isospora в семейство Eimeridae. Д.Н. Засухин всегда предостерегал молодых и амбициозных исследователей от ненужной поспешности, в плане определения систематического положения токсоплазмид, тем более в объединение их в одно семейство с эймеридами. В работе опубликованной в 1975 г. совместно с В.Н. Калякиным он пишет: «Систематическое положение токсоплазмид в классе Sporozoa до сих пор ещё не ясно, так как систематическая близость между токсоплазмидами и кокцидиями не установлена». Необходимо особо подчеркнуть, что эти высказывания относились уже к средине семидесятых годов. К этому времени были изучены жизненные циклы токсоплазм и саркоспоридий, однако ещё многое оставалось не ясным в проблеме токсоплазмид и токсоплазмидозов. Поэтому и предостерегал Дмитрий Николаевич от поспешности всякого объединения, только по тому, что у некоторых токсоплазмид была обнаружена половая фаза развития сходная с эймериями.

В отношении эволюционного развития токсоплазмид (включая и B.besnoiti), а также других паразитических простейших, мнения исследователей расходятся кардинально. Одной из гипотез, на сегодняшний день, является гипотеза, что эволюция всех паразитических простейших шла и идёт в направлении от паразитирования простейших, вначале, в просвете кишечника организма хозяина, затем в его предэпитеальном слое, затем в эпителиальных клетках, а затем, в клетках внутренних органов и наконец, в клетках ретикуло – эндотелиальной системы и в клетках крови. При этом у многих паразитических простейших, просвет кишечника или эпителиальные клетки ворсинок, стали местом формирования гамет и началом половой фазы развития.

Если придерживаться этой гипотезе, то B.besnoiti уже потеряли своего дефинитивного хозяина, в котором когда - то осуществлялся половой процесс и перешли исключительно к бесполому (вегетативному) размножению и развитию. Что касается токсоплазм и неоспор, то они на стадии потери дефинитивного хозяина, поскольку могут бесконечно долго размножаться бесполым путём, минуя половой процесс. Практически, согласно этой гипотезе, на данном эволюционном пути, безноитиям, токсоплазмам и неоспорам половой процесс и не нужен.

Однако, такая гипотеза разделяется не всеми исследователями (Landau,1973; Lainson et al.,1976; Overdulve,1977). Так, Ландао считает, что эймерии произошли от целомических грегарин. И передавались от животного к животному путём системы хищник – жертва. А J.P.Overdulve, например, предлагает рассматривать токсоплазм, как древнего предка не только токсоплазмид, но и всех «истинных или классических» кокцидий. Согласно его гипотезе, вначале паразиты размножались в организме хозяина только бесполым путём - в клетках крови и в клетках ретикуло – эндотелиальной системы и других клетках внутренних органов. И, только позже они «оккупировали» кишечник и поселились в его эпителии. Часть паразитов впоследствии использовала эритроциты и клетки РЭС для полового развития.  Другая же часть паразитов, для полового размножения и развития адаптировались в кишечнике организма хозяина, с последующей споруляцией в кишечнике или во внешней среде.

Согласно этой гипотезе, вначале, паразиты передавались от животного к животному жалящими насекомыми, перорально, половым путём,  путём хищничества и другими всевозможными путями. И только позже у них появляется кишечная фаза развития и размножения. Ярким подтверждением этой гипотезы является жизненный цикл Besnoitia besnoiti, Toxoplasma gondii и Neosporum caninum. Следуя логике этой гипотезе, безноитии крупного рогатого скота, в эволюционном плане - это более молодые паразиты, которые ещё не нашли своего дифинитивного хозяина, где бы у паразитов сформировалась половая фазы развития. А токсоплазмы и неоспоры, в эволюционном плане, более старые, поскольку они нашли себе хозяина для полового развития. Однако для этих паразитов половой процесс ещё и не обязателен. Поэтому токсоплазмы и неоспоры могут годами, практически, бесконечно долго, циркулировать в природе, минуя половой процесс.

Жизненные циклы облигатно - гетероксенных саркоспоридий свидетельствуют, что идёт эволюционирование токсоплазмид от факультативной гетероксенности к строго облигатно – гетерогенному циклу развития и размножения. И тогда, учитывая эволюционный возраст токсоплазмид можно расставить их следующим образом: самые молодые - Besnoitia besnoiti и другие представители рода Besnoitia, за ними идут Toxoplasma gondii и Neosporum caninum и замыкают эволюционную лестницу токсоплазмид представители рода Sarcocystis.

В поддержку гипотезы J.P.Overdulve является также достоверно установленный факт - способность токсоплазм, неоспор, атоксоплазм и некоторых изоспор (I.felis, I.rivolta) использовать одно и то же животное как дефинитивного, так и промежуточного хозяина. Для токсоплазм такими хозяевами являются представители семейства Felidae, для неоспор - это представители семейства псовых (Canidae), для атоксоплазм – это воробьи и канарейки, для I.felis – кошки, для I.rivolta – собаки. И ещё не маловажный факт в поддержку этой гипотезы. Это способность тканевых мерозоитов токсоплазм и атоксоплазм проникать из внутренних органов организма хозяина в эпителий тонкого отдела кишечника, и после серии бесполых стадий размножения, формировать гаметоциты, и давать начало кишечной, половой фазе размножения.

Таким образом, на примере жизненных циклов токсоплазм и атоксоплазм, мы видим реальное подтверждение гипотезы J.P.Overdulve о возможности паразитов проникать в организм животного любым путём - перорально, внутрибрюшинно, подкожно, внутримышечно, половым путём, путём хищничества и т.д. и после серии вегетативного размножения во внутренних органах, мигрировать затем в кишечник и давать кишечной фазе полового развития. Обладают ли такой способностью неоспоры, I.felis, I.rivolta и другие токсоплазмоподобные организмы покажет время.

Основываясь на данных исследований последних 15 – 20 лет и учитывая мнение ведущих протозоологов мира, можно предположить, что эволюция паразитических простейших идёт двумя путями. Первый путь – от кишечного развития и размножения паразитов к тканевому паразитизму и второй путь - от тканевого паразитизма к кишечному. Первым путём идёт эволюционное развитие представителей отряда Coccidiida (по систематике Е.М. Хейсина, 1967 г). Вторым путём идёт эволюционное развитие токсоплазмид, пироплазмид и гемоспоридий.

В этой связи интересно вспомнить биохимические работы, проведённые в конце 60, начале 70 годов по изучению состава ядерной ДНК в разных группах простейших. Так, по данным H. Neimark и R.G.Blaker(1967) плотность ДНК трофозоитов токсоплазм близка к таковой у жгутиконосцев (Zoomastigina) и кишечной палочки (Escherichia coli), а доля гуанина и цитозина (ГЦ –пары) составляет 53 процента. Независимые исследования J.Perroto и др. (1971), практически, подтвердили данные H. Neimark и R.G.Blaker. По их данным доля гуанина и цитозина в ДНК трофозоитов токсоплазм составляет 57 процентов.

Г.Н.Зайцева и Н.А. Шинина (1976) изучая нуклеотидный состав ядерной ДНК в разных группах простейших пришли к выводу, что у малярийного плазмодия преобладает доля ДНК АТ – типа( аденина и тимидина), а доля гуанина и цитозина составляет всего 27 процентов (У токсоплазм 57 процентов, прем. автра). А известно (Ленинджер, 1974), что у всех высших животных и растений, ДНК представляет собой соединения аденина и тимозина (ДНК АТ –типа). На основании своих биохимических исследований авторы делают вывод, что малярийный плазмодий в эволюционном плане является «моложе» токсоплазм, поскольку ядерная ДНК токсоплазм, в основном, состоит из ГЦ – группы, что свидетельствует о более древнем происхождении этих организмов.

В этой связи правомерно бы было поддержать предложение N D. Levine (1973) о выделении гемоспоридий и токсоплазмид в отдельный подтип Apicomplexa, класса Sporozoа. И в этом классе создать два подкласса - подкласс Coccidisina и подкласс Haemosporina, в который могли бы войти два отряда – отряд Haemosporida и отряд Toxoplasmida. Эти два отряда объединяются в один подкласс, поскольку и те и другие, в первую очередь, являются паразитами клеток крови - лимфоцитов, моноцитов, сегментоядерных лейкоцитов, эритроцитов и клеток РЭС. При таком эволюционном подходе к систематическому положению простейших, паразитические организмы, эволюционирующие от кишечного паразитизма к тканевому, объединяются в отдельный подкласс (Coccidisina) в классе Sporozoа.

В  последнее  время,  появляется   всё  больше  учёных придерживающих  мнения,  что  токсоплазмы  по  своему  морфологическому  строению  и  жизненному  циклу ближе находятся  к  гемоспоридиям. Так,  немецкий  профессор Франк Зибер(Frank Seeber) из берлинского  Института  имени  Роберта Коха считает, что  токсоплазмы  являются  близкими  родственниками  малярийного  плазмодия. Это  заключение  профессор  сделал  на  том  основании,  что  как   у  токсоплазм,  так и  у  малярийного  плазмодия имеется  общая  структура – это апикопласт (по –видимому  апикомплекс). Его особенность в том, что он имеет растительное происхождение, - поясняет ученый.  Когда-то давно, на ранних стадиях эволюции, предок нынешних токсоплазм и плазмодиев интегрировал в себя симбиотическую микроскопическую водоросль и таким образом обрел этот самый органоид, отвечавший в водоросли за фотосинтез. Самое главное для нас - то, что теперь внутри апикопласта этих паразитов реализуются специфические метаболические пути, человеку не свойственные. Из этого следует,  заключает профессор  Зебер,  что средство, разработанное для подавления токсоплазм,  имеет неплохие шансы оказаться  эффективным  и против плазмодиев.

О положении B.besnoiti в системе простейших

Систематика простейших до известной степени это искусственное построение, так как в основу её берутся различные признаки кажущиеся важными на определённом этапе наших знаний о животных. И она (систематика) меняется, по мере того как появляются всё новые и новые данные о структуре и жизненных циклах паразитических простейших. Так, первоначально, в основу классификации простейших были взяты органы передвижения. И всех простейших разделили на 4 класса. Первый класс: Sarcodina или Rhizopoda; второй класс: Sporozoa; третий класс: Mastigofora и четвёртый - Infusoria.

Затем(Doflein,1902) в основу классификации паразитических простейших положил «органы оплодотворения и размножения» и объединил первые три класса в одну группу, в подтип Plazmodroma, а Infusoria отнес в подтип Ciliophora. Однако и такой подход не смог, бесспорно, объединить всех паразитических простейших в создаваемых системах. При таком подходе основные разногласия возникли при определении гемоспоридий и в частности представителей группы Plasmodium. Если брать за основу «половой признак» то малярийные плазмодии должны были бы войти в группу Coccidia, хотя сходство этих двух групп заключается только в том, что у малярийных плазмодиев есть половая фаза, завершающаяся образованием спор в организме комара. Говорить о полной идентичности не может быть даже речи, поскольку «истинные» кокцидии живут в эпителиальных клетках человека и животных. Шизогоия, образование гаметоцитов и образование зиготы у кокцидий происходит в одном и том же позвоночном хозяине, а споруляция во внешней среде. У малярийного плазмодия шизогония и гаметогония происходит в

клетках крови – лейкоцитах, эритроцитах и клетках РЭС и гепатоцитах позвоночного хозяина, а оплодотворение и спорогония в другом(дефинитивном) хозяине, которым является переносчик - насекомое(комар). «Половой подход» не смог внести ясности и в другие группы кровепаразитов, таких как пироплазмы, тейлерии и представителей рода Leucocytozoon. Согласно «половой» классификации безноитии, токсоплазмы, саркоспоридии, тейлерии, пироплазмы были помещены как паразиты с неопределённой природой около класса Sporozoa. Затем в основу систематики паразитических простейших стали брать не только один, какой то определённый признак, а весь жизненный цикл паразита, включая и его морфологию. В результате такого подхода гемогрегарины, гемоспоридии, токсоплазмиды, плазмодии и пироплазмы оказались в одном подпорядке (подотряде, прим. автора) Haemosporidia порядка Coccidiomorpha (Н.Велю, 1930).

Такой систематике класса Sporozoa придерживались до 1967 года прошлого столетия. В 1967 году Е.М. Хейсен модифицировал систиматику паразитических простейших и выделил в классе Sporozoa два подкласса - подкласс Gregarinina и подкласс Coccidiomorpha с тремя отрядами – Protococcidiida, Adeleida и Coccidiida. В отряде Coccidiida выделил два подотряда - Eimeriidea и Haemosporidiidea, куда вошли все паразитические простейшие класса Sporozoa.

Согласно этой классификации всех представителей подкласса Gregarinina стали называть грегаринами, а представителей подкласса Coccidiomorpha кокцидиями. Однако в узком понимании, типичными или классическими кокцидиями обычно являются представители только семейства Eimeriidaе. Е.М. Хейсин не включил токсоплазмид в класс Sporozoa, а поддержал предложение Е. Biocca (1956) о выделении токсоплазмид в отдельный класс Toxoplasmatea внутри подтипа Plasmodroma.

Такой систематике учёные придерживались до 1969 года. В начале 70 – х годов прошлого столетия у токсоплазм была открыта половая фаза развития(Hutchison et al. 1969, 1970; Frencel et al.1970; Overdulv,1970) и у Sarcocystis (Rommel et al.1972; Rommel and Heydorn.1972). Было установлено, что половая фаза развития у токсоплазм и саркоспоридий осуществляется подобно эймериям. Однако она далеко не идентична эймериям. Несмотря на это, опять отдельными исследователями, как и 70 лет назад, был взят в основу классификации один признак - половой и в результате такого подхода, всех токсоплазмид, включая и Besnoitia besnoiti (скопом) помещают в подсемейство Isosporinae в семействе Eimeriidae(Бейер и др.1978). Правда, в 1970 году Н.Д. Ливайн(Lеvaine) при составлении системы классификации паразитических простейших, взял за основу ультратонкое строение паразитических простейших класса Sporozoa и объединил их в подтип Apicomplexa. В системе Н.Д. Ливайна безноитии крупного рогатого скота (B. besnoiti) помещены, как отдельный род в семействе Sarcocysidae.

С включением токсоплазм и всех токсоплазмид в подотряд Eimeriidеа семейства Eimeriidae категорически не был согласен академик И.Г.Галузо. Он в 1970 году, после открытия половой фазы развития у токсоплазм (T.gondii) и саркоспоридий (S.fusiformis) выделил токсоплазмид в самостоятельный отряд в классе Sporozoa. Как мы видели ранее, о выделении токсоплазмид в самостоятельную таксономическую группу, на высоком уровне, ратовал и профессор Д. Н. Засухин.

На основании данных того времени (конца 60 –х начала 70 –х годов), И.Г. Галузо так подвёл общий итог исследованиям того времени в книге «Жизненный цикл токсоплазм» вышедшей в свет в 1974 году: «Прежде всего, надо снять вопрос, который нередко ставят перед нами: токсоплазма кокцидия или нет? И равносильный ему: изоспора токсоплазма или нет? Видимо, ни то и не другое. Когда все токсоплазмоподобные организмы (известные и неизвестные) найдут себе «напарников» среди Eimeriidae, когда будут решены ещё многие неясности, в частности механизм пролиферации у кокцидий, когда будут, с ориентацией на работы по изучению жизненного цикла токсоплазм, пересмотрены механизмы развития кокцидий, тогда окончательно решится волнующий систематиков вопрос о месте токсоплазмид, равно как и кокцидий, в системе простейших. Между тем уже сейчас совершенно очевидно, что как по характеру половой и бесполой фазы развития токсоплазм, которая имеет значительные различия с известным планом развития кокцидий, так и по поведению тех и других в природе эти две группы организмов стоят в значительном таксономическом удалении друг от друга».

К сожалению, эта книга была последней работой в жизни И.Г. Галузо и приведённое заключение к главе «О единстве природы токсоплазм и изоспор» стало, как бы завещанием и основным направлением изучения токсоплазмид для его учеников.

Систематика паразитических простейших и в частности токсоплазмид предложенная И.Г.Галузо В 1974 году, в сокращённом виде представляется следующим образом:

Класс Sporozoa Leuckart, 1879

- Подкласс Coccidiomorpha, Dof llein, 1901

- Отряд Coccidiida, Labbe, 1899

- Отряд Toxoplasmida, Biocca, 1957

- Семейство Toxoplasmidae, Dubey Frenkel,1970

# Род Toxoplasma

# Род Sarcocystis

# Род Besnoitia

# Род Frenkeiia,

# Род Isosporа

# Род Isospora,

Со времени предложенной академиком И.Г.Галузо классификации прошло уже более  сорока  лет.  К настоящему времени полностью изучен жизненный цикл T.gondii, B.besnoiti, Sarcocyctis, Atoxoplasma, I. felis и I. rivolta. Открыта бесполая и половая фазы развития и размножения у Neosporum caninum. Оказалось, что жизненный цикл неоспор, практически, идентичен c таковым у T.gondii. Круг животных поражаемый неоспорами примерно такой же, как и у токсоплазм. Различие заключается лишь в том, что для токсоплазм дефинитивным хозяином являются все представители семейства Felidae, а для неоспор (N. caninum), представители семейства псовых - Canidae. Важным открытием для протозоологов стало обнаружение у I. felis и I. rivolta внекишечных стадий развития в организме промежуточных хозяев, которые заканчиваются образованием дермозоитов (Dubey, Frenkel,1972). Дермозоиты способны дать начало, в кишечнике дифинитивного хозяина, половому процессу завершающимся образованием неспорулированных зигоцист (изоспор). Это открытие сближает представителей рода Isospora с токсоплазмидами и не позволяет рассматривать больше I. felis и I. rivolta, как моноксенных паразитов. Обнаружение у I. felis и I. rivolta внекишечных стадий развития даёт право включить этих паразитов в отряд Toxoplasmida, выделив их в отдельное семейство.

Полученные в последние годы новые данные в отношении токсоплазмид ещё раз подтверждают, что эта группа паразитических простейших заметно отличается от так называемых «классических или истинных кокцидий», как по эндогенному размножению и развитию, так и по циркуляции их в природе. Полученные новые данные дают основание пересмотреть сложившееся представление о месте не только безноитий крупного рогатого скота в системе простейших, но и токсоплазм, неоспор, саркоспоридий и других паразитических простейших. Нам представляется правомерно будет сохранить в системе простейших отряд Toxoplasmida. И в память о видных советских протозоологах ХХ века - Дмитрия Николаевича Засухина и Иллариона Григорьевича Галузо, внёсших огромный вклад в историю развития протозоологии, основателей двух первых центров по изучению проблемы токсоплазмоза в СССР, назвать отряд их именами. А вид Besnoitia besnoitii назвать именем профессора Б.П. Всеволодова, впервые описавшим этих паразитов в СССР.

С учётом выше изложенного, нам система токсоплазмид представляется на сегодняшний день следующим образом:

Тип Protosoa

Подтип Apicomplexa Levine, 1973

Класс Sporozoa Leuckart, 1879

Подкласс Coccidiomorpha Dof llein, 1901

Отряд Coccidiida Labbe, 1899

Семейство Eimeriidae Minchin, 1903

Подкласс Haemosporina Danilewski, 1885

Отряд Toxoplasmida Biocca, 1957, Zasuhin and Galuso, 1970

Семейство Neosporidae Bjerkas, Mohn, Presthus, 1984

Род Toxoplasmа Hatchison, 1969, Dubey, Frenkel,1970

- Вид T. gondii, Nicolle and Manceaux, Splendore,1908

- Род Neospora Dubeу, 1988

- Вид N. caninum

Род Besnoitia Marotel, 1912

- Вид B. besnoitii Marotel, 1912, Vsevolodov, 1959

- Вид B.jellisoni .

- Вид B.darlingi

- Вид B.tarandi

- Вид B.wallcei

Cемейство Sarcocystidае Ray Lankester 1882

Род Sarcocystis Rommel, Heydorn,1972

- Вид S.fusiformis

- Вид S.tenella

- Вид S. mischeriana и др.

Род Frenkelia Biocca, 1968

- Вид F.frenkeli Rommel,Krampitz, 1975 и др

Семейство Isosporidae Schneider 1881

Род Isospora Wenyony 1923.

- Вид I. felis

- Вид I. rivolta и др.

Отряд Piroplasmida Wenyon,1926

Отряд Haemosporida Levine, 1961

Отряд Adeleida Leger,1911

Основные признаки подкласса Haemosporina

- Паразиты с хорошо выраженным апикальным комплексом;

- Паразиты белых элементов крови, клеток ретикуло – эндотелиальной системы и эритроцитов;

- Паразиты с факультативной и облигатной гетероксенностью;

- Широкая хозяинная специфичность паразитов. (Паразит способен размножаться в организме не менее двух видов животных - млекопитающих, птиц, человека, кровососущих насекомых и клещей);

- Паразиты, сходные по морфологическим признакам и жизненным циклам, но у которых может отсутствовать половой процесс и споруляция;

- Паразиты, способные размножаться, как в цитоплазме инвазированных клеток, так и в их ядрах;

- Паразиты, в жизненном цикле которых чередуется фаза внутриклеточного и внеклеточного развития и размножения;

- Паразиты, половая фаза развития и размножения которым не обязательна, хотя она и присутствует в их жизненном цикле;

- Развитие зиготы идёт через споруляцию с образованием 8 и более спорозоитов в каждой зигоцисте (ооцисте) или превращение зиготы в подвижную оокинету ;

- Спорогония протекает как внутри организма хозяина, так и во внешней бреде  и заканчивается образованием спорозоитов;

- Половая фаза развития и размножения может проходить, как в организме млекопитающих и птиц, так и в организме кровососущих насекомых и клещей;

- Обязательная (гемоспоридии, саркоспоридии) или необязательная смена дефинитивного хозяина (токсоплазмы, безноитии, неоспоры, изоспоры, атоксоплазмы и др.);

Основные признаки отряда Toxoplasmida

- Многохозяенный паразит, со сложным жизненным циклом и резко гипертрофированной бесполой фазой развития и размножения

- Паразит, жизненный цикл которого включает размножение и развитие в организме дефинитивного, промежуточного хозяина и во внешней среде.

- Паразит, для которого половой процесс может быть и не обязателен;

- Паразит, который на одном из этапов эндогенного размножения, имеет фазу колониального развития со «специализацией» паразитов внутри колонии;

- Пролиферация паразита в организме хозяина проходит беспрерывно. Она может протекать, переходя от одного хозяина к другому, без участия половой стадии развития и спорогонии;

- Паразит, бесполый цикл размножения и развития которого, в организме хозяина, включает фазу трофозоита (фазу  пролиферации), псевдоцисты(фазу  подготовки паразитов  к  формированию  тканевых  цист  размножения) и фазы тканевой цисты размножения(фазы  медленного  размножения  и  сохранения  паразитов в  организме  хозяина и подготовки их для  дальнейшей  циркуляции  в  природе);

- Паразит, в фазу трофозоита (пролиферации)  способные  размножаться  как  внутриклеточно,  так  и  внеклеточно.

Паразит, при  внутриклеточном  размножении, способные  образовывать вокруг себя паразитофорную вакуоль(зону  питания).

- Паразит, в фазу образования тканевых цист – это внеклеточные, колониальные организмы, образующие вокруг колонии паразитов питательную зону (колониальную паразитофорную вакуоль) - в стенке оболочки цисты или в прицистном слое;

- Паразит, у которого тканевая циста образуется в результате сложного биологического взаимодействия колонии паразитов с организмом хозяина. Образуют оболочку цисты сами паразиты за счёт «строительного» материала организма хозяина и являются, в большинстве случаев, продуктом внеклеточного, колониального развития и размножения паразитов;

- Паразит, который при образовании тканевых цист, под воздействием ферментов паразитов, превращает все ткани и клетки организма – хозяина, включая и их ядра, в гомогенную слизистую массу богатую нуклеиновыми кислотами, белками и мукополисахаридами, которые в дальнейшем, являются питательной средой для колонии паразитов;

- Паразит, тканевая циста, которых является «домом - коконом» для колонии паразитов, построенный за счёт организм хозяина. Это циста размножения, которая при благоприятных для паразитов условиях, может продолжить поддержание вида в другом организме животного или вызвать реинвазию.

- Паразит, который  может быть передан другим животным и человеку через мясо, молоко, яйца, и другие виды продуктов животноводства, а так же с помощью кровососущих насекомых и клещей;

- Половая фаза развития, в дефинитивном хозяине протекает в эпителии ворсинок тонкого отдела кишечника или под эпителием и завершается образованием зигоцист, которые  могут  спорулировать, как в организме хозяина (саркоспоридии), так и во внешней среде (токсоплазмы, неоспоры);

- Конечным продуктом полового развития паразита является зигоциста (изоспора) с двумя спорами, в каждой из которых формируется по четыре спорозоита.

Основные признаки семейства Neosporidae

- Паразиты, жизненный цикл которых включает размножение и развитие в организме дефинитивного, промежуточного хозяина и во внешней среде;

- Паразит,с факультативной гетероксенностью;

- Паразит, который может развиваться и размножаться в организме двух особей разных видов хозяев – дефинитивный - промежуточный. Однако смена дефинитивного хозяина на промежуточный не обязательна;

- Паразит, половая стадия развития и размножения которых проходит только в эпителиальных клетках тонкого отдела кишечника и завершается образованием зиготы и зигоцисты;

- Паразиты, у которых при пероральном попадании изоспор в организм дифинитивного хозяина, спорозоиты не дают сразу начало фазе вегетативного размножения. Прежде чем начнётся половая фаза размножения, спорозоиты должны покинуть кишечник, вызвать генерализованное заражение организма  хозяина, пройти фазу трофозоита (пролиферации), псевдоцисты, цисты во  внутренних  органах и только после возвращения уже тканевых паразитов (мерозоитов  или эндозоитов) в кишечник дефинитивного хозяина, они смогут дать начало половой фазе в кишечнике.

- Паразиты, у которых при прохождении фазы бесполого размножения в кишечнике дефинитивного хозяина нет строго детерминированных стадий размножения, как это имеет место у эймерий. Паразиты размножаются с асинхронной сменой генераций;

- Паразиты, в жизненном цикле которых, внекишечная фаза включает в себя строго детерминированную стадию трофозоита, псевдоцисты и тканевой цисты размножения;

- Паразиты, у которых кишечная фаза, одновременно сопровождается генерализованным заражением всего организма с образованием псевдоцист и тканевых цист размножения во внутренних органах;

- Паразиты, для которых один и тот же хозяин может быть и дефинитивным, и промежуточным хозяином. В дефинитивном хозяине, мерозоиты из тканевых цист, в любое время, могут мигрировать в кишечник и дать начало новой фазе полового размножения в эпителиальных клетках тонкого кишечника;

-Паразиты, которые  на  любой  стадии (кроме  гамет) заразны для многих видов животных и человека при любом методе ведения;

- Паразиты, изоспоры которых заразны для других животных и человека при любом методе их введения в организм; -Паразиты, у кторых любая кишечная стадия бесполого размножения в организме дефинитивного хозяина (кроме гамет, зиготы и неспорулированной зигоцисты) является инвазивной для других животных и человека;

- Паразиты, у которых половая фаза развития от спорозоита до зигоцисты, проходит, минуя промежуточного хозяина, и в общем жизненном цикле паразита чередование хозяев – дефинитивный – промежуточный – дефинитивный не обязательна;

- Паразиты, у которых для поддержания вида в природе не обязательна половая фаза развития. Паразит, как вид длительное время (практически, бесконечно) может, поддерживаться в природе, размножаясь только бесполым путём; - Паразиты имеют двойной механизм передачи от донора к реципиенту: Первый, через трофозоитов и мерозоитов псевдоцист и тканевых цист, которые проникают в организм хищника от жертвы путём контаминации. Второй, через трофозоитов и мерозоитов псевдоцист и тканевых цист при внутриутробном заражении - от матери плоду через плаценту.

- Паразиты, в фазу пролиферации (вегетативного размножения) способны инвазировать и размножаться, практически, во всех клетках организма – хозяина, включая лейкоциты и клетки ретикуло-эндотелиальной системы - Животные и человек заражаются от разных видов животных и от особей того же вида;

Основные признаки семейства Sarcocystidае

- Облигатно - гетероксенный цикл размножения паразитов;

- В фазу пролиферации, в организме промежуточного хозяина – это паразиты белых элементов крови и клеток РЭС;

- Отсутствие у паразитов цикла размножения от изоспоры (спророцисты) до изоспоры (спороцисты) в организме дефинитивного хозяина. Спорцисты выделяемые окончательным хозяином не заразные для него самого;

- Отсутствие бесполой фазы размножения в кишечнике и других органах дефинитивного хозяина;

- Прогамное размножение и развитие паразитов происходит только в организме промежуточных хозяев;

- Половой процесс паразитов происходит под эпителием тонкого отдела кишечника, который завершается тут же споруляцией зигоцисты и образованием изоспор - двух спор с четырьмя спорозоитами в каждой споре;

- Во внешнею среду с фекалиями выделяются уже спорулированные изоспоры с восьмью спорозоитами или свободные спороцисты с четырьмя спорозоитами;

- Паразиты, с выраженным тропизм к мышечной ткани – скелетной и сердечной;

- Фаза пролиферации завершается образованием тканевых цист в саркоплазме мышечных волокон или внеклеточно;

- Оболочка тканевой цисты является продуктом колониального развития паразитов и гидролиза саркоплазмы мышечных волокон; - При неблагоприятных экологических и других условиях, когда наступает тотальная атрофия скелетных мыщц и миокарда, формирование цист может проходить внеклеточно. В таких случаях гидролизу подвергаются все ткани расположенные вокруг колонии паразита.

- Тканевые цисты образуются в результате сложного взаимодействия организма хозяина и колонии паразитов путём внутриклеточного или внеклеточного размножения и развития паразитов;

- Тканевые цисты имеют чётко обусловленные  полюса - полюс размножения и полюс формирования цистной оболочки, внутри цисты, разделены перегородками - септами;

- Молодые цисты, в которых паразиты не завершили фазу прогамного деления не инвазивны для дефинитивных хозяев; - Отсутствие трансмисси паразитов между промежуточными хозяевами;

- Отсутствие внутриутробной передачи инвазии;

- Отсутствие возможности рецидивирования болезни в организме промежуточного хозяина, поскольку цистный мерозоит(брадизоит) является по сути гамоном (половой клеткой) и может продолжить своё развитие только в кишечнике дефинитивного хозяина;;

- Дефинитивные хозяева, в связи с отсутствием бесполой фазы развития в их организме, остаются серонегативными;

- Предцистные стадии саркоспоридий – меронты и мерозоиты – вызвать заражение дефинитивного хозяина не когут.

Основные признаки семейства Isosporidae

- Двуспоровая форма ооцист = изоспор, с четырьмя спорозоитами в каждой споре;

- В большинстве своём – это паразиты со строгой локализацией и прохождением жизненного цикла в эпителии кишечника одного хозяина - от изоспоры до изоспоры; (Исключение составляют I.felis и I.rivolta, у которых наряду с кишечным размножением, обнаружена внекишечная фаза размножения и развития в организме одного и того же хозяина (Dubey Frenkel, 1972))

- Цикл развития паразита факультативно гетероксенный;

- Изоспоры выделяются вместе с фекалиями в неспорулированном состоянии и спорулируют во внешней среде при достаточном доступе кислодрода;

- Спорулированные изоспоры инвазионны для дифинитивных и промежуточных хозяев;

- Половому процессу в кишечнике дефинитивного хозяина предшествует бесполое размножение;

- Жизненный цикл паразита включает в себя размножение и развитие в организме дефинитивного хозяина и во внешней среде;

- В организме промежуточных хозяев может формироваться циста - циста сохранения, состоящая из одного паразита (гипнозоита или дермозоита);

- Гипнозоиты (дермозоиты) не инвазионны для промежуточных хозяев;

- Невозможность заразить других животных подкожно или парентерально зрелыми, спорулированными изоспорами;

- Отсутствие трансплацентарного пути заражения;

Рассматривая предложенную систематику у специалистов может возникнуть естественный вопрос: правомерно ли помещать в отряд Toxoplasmida таких «типичных кокцидий», какими являются представители семейства Isosporidae? Ответ на это дают исследования последних лет. Как было показано выше, при детальном изучении эндогенного размножения и циркуляции в природе, такие представители этого семейства как I. felis I. rivolta I.lacazei, I.chloridis и I.arctopitheci оказались не такими уже классическими кокцидиями. По своему эндогенному размножению в организме дефинитивных и промежуточных хозяев, а так же циркуляции в природе, они сходны с токсоплазмами и неоспорами. Отличие проявляется лишь в том, что у представителей семейства Isosporidae отсутствует фаза колониального развития и размножения в организме промежуточных хозяев. Вместо тканевых цист размножения, изоспориды образуют цисты сохранения, в котором находится только один инвазионный дермозоит; отсутствует (вернее не доказан) половой и внутриутробный путь передачи от животного к животному. Отсутствют данные передачи заразного начала жалящими насекомыми. В остальном, жизненные циклы представителей семейства Isosporidae схожи с таковыми у токсоплазмид. Это - двуспоровое развитие зигоцисты (ооцисты); наличие апикального комплека; поликсенные паразиты; общий план развития в стадии гаметогенеза; наличие промежуточных (факультативных) хозяев; наличие внекишечной стадии развития в организме дефинитивного хозяина.

Таким образом, ответ, на спорный вопрос заданный И.Г.Галузо в конце 70 – х годов: - токсоплазма кокцидия или нет? И равнозначный ему: изоспора токсоплазма или нет? Разрешился в начале ХХ1 столетия, благодаря усилиям многочисленных исследователей - паразитологов, цитологов, патоморфологов и биохимиков в разных странах мира. Представители разных родов Isospora оказались ближе к токсоплазмидам, чем к эймеридам, поэтому на этом основании, вполне могут быть включены в отряд Toxoplasmida на уровне семейства.

 

Предыдущая часть

Телефон  для  контакта  -  (044) – 426 – 47 – 76 (78).

Email: bugaev@ukr.net

• © 2013-2015 www.vetbugaev.kiev.ua
• Все права защищены.
• Использование любых материалов, размещённых на сайте, разрешается при условии ссылки на www.vetbugaev.kiev.ua
• При копировании материалов со страницы www.vetbugaev.kiev.ua для интернет-изданий – обязательна прямая открытая для поисковых систем гиперссылка. Ссылка должна быть размещена в независимости от полного либо частичного использования материалов. Гиперссылка (для интернет- изданий) – должна быть размещена в подзаголовке или в первом абзаце материала.