- Электрофорез
- Диагностика Необластом(ОПУХОЛЕЙ)
- Воспитание щенков и котят
- Кормление собак и кошек
- Чтобы не болеть
- Уход за зубами
- Уход за кожей и шерстью
- Блохи у кошек и собак
- Болезни морских свинок
- Болезни кроликов
- Состояние зубов
- Стрижка животных
- Удаление когтей
- Укус клеща у собак
- Переломы у собак, кошек
- Роды кошки и собаки
- Вопросы и Ответы
- Статьи
- Карта сайта
- covid19
- Исследования опухоли крысы(Роберта)
НЕОСПОРОЗ
Сравнительный анализ жизненного цикла Неоспор и представителей подкласса Haemosporinа.
Работа опубликована в Интернете 22 мая 2015г.
А.М. Бугаев – Директор Центра охраны здоровья животных г. Киев.
В.А. Бугаев – Президент ассоциации ветеринарных врачей Казахстана.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Резюме.
2. Предисловие.
3. Терминология используемая в статье.
4. Общие Сведения о Неоспорах и Токсоплазмидах.
5. Морфология Трофозоитов Неоспор и Токсоплазмид.
6. Морфология Тканевых Неоспор и Токсоплазмид.
7. Сравнительный анализ размножающихся кровепаразитов в организме промежуточных хозяев.
8. Сравнительный анализ размножающихся кровепаразитов в организме промежуточных хозяев.
9. Обсуждение.
10. Список использованной литературы.
А. Монографии общего характера.
В. Работы по частным вопросам.
РЕЗЮМЕ.
В работе дан сравнительный анализ морфологии неоспор и их жизненного цикла с таковыми токсоплазмид и некоторых кровяных споровиков. На основании данных собственных исследований и материалов опубликованных в открытой печати, авторы пришли к заключению, что неоспоры не только морфологически сходны с токсоплазмидами, но и имеют подобный жизненный цикл. По морфологии и жизненному циклу неоспоры, в основном, повторяют жизненный цикл токсоплазм. Различие заключается лишь в том, что для токсоплазм дефинитивным хозяином является представители семейства кошачьих, а для неоспор – представители семейства псовых. Многие вопросы жизненного цикла неоспор и влияния их на организм хозяина изучены ещё недостаточно. Однако даже на основании того, что уже опубликовано в открытой печати, можно сделать вывод, что неоспоры, как и токсоплазмиды имеют ряд кардинальных отличий от эймерий, или «истинных, классических» кокцижий, как в плане цикла развития, так и влияния их на организм животных. Понимание этих отличий имеет важное значение как для окончательного определения их в системе простейших, так и выработки стратегии лечения животных больных неоспорозом. Практика показала, что лечение токсоплазмоза, неоспороза и других токсоплазмидозов домашних и сельскохозяйственных животных весьма трудная задача. И не один препарат, эффективно применяющийся при лечении кокцидиозов животных, на внекишечные стадии развития неоспор и токсоплазмид не действует. В то же время, в последние годы появляется всё больше сведений лечения токсоплазмоза людей и животных противомалерийными препаратами и в частности ФАНСИДАРОМ. В ветеринарной клинике Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева г. Киева, получены обнадёживающие результаты применения фансидара при лечении токсоплазмоза кошек и неоспороза собак.
Авторы надеются, что публикуемая работа поможет практикующим ветеринарным врачам осмысленно подойти к известным схемам лечения неоспороза, токсоплазмоза и других токсоплазмидозов домашних и сельскохозяйственных животных. А студентам и молодым научным сотрудникам, изучающим паразитических простейших, глубже понять многие вопросы объединяющие неоспор с токсоплазмидами и с кровепаразитами.
ПРЕДИСЛОВИЕ.
После описания Bjerka˚s I, Mohn SF, Presthus J. неоспороза у собак в 1984 году, интерес учёных и практикующих ветеринарных врачей резко возрос не только к этому заболеванию, но и к проблеме токсоплазмид в целом. Необходимость изучения проблемы неоспороза определяется тем, что это заболевание широко распространено среди сельскохозяйственных животных и представителей отряда псовых, нанося огромный вред их здоровью (Чернышова О.А.,2000; Бакшеев В.И., 2001). Несмотря на это никаких методов лечения сельскохозяйственных животных до настоящего времени не разработано. Поэтому нередко на прилавки даже элитных супермаркетов попадает мясо животных зараженных неоспорами. Есть все основания полагать, что неоспоры оказывают патогенное влияние и на организм человека. Поэтому неоспороз может рассматриваться как зоонозное заболевание. Кроме того, жизненный цикл неоспор проливает свет на отдельные стороны саркоспоридиозов животных и человека, поскольку до сих пор не стихают дискуссии о систематическом положении токсоплазмид и особенно таких паразитов, как Besnoitia besnoiti и Toxoplasma gondii. Полученные результаты исследований жизненного цикла неоспор заставляют по новому подойти не только к вопросу положения неоспор в системе простейших, но и к проблеме лечения неоспороза у представителей семейства псовых.
При изучении эндогенного и экзогенного циклов развития и размножения неоспор, а так же определения их места в системе простейших, исследователи вольно или невольно сравнивают их эндогенный цикл и циркуляцию в природе с другими паразитическими простейшими и, в частности, с токсоплазмами и с саркоспоридиями. Было, например, установлено, что жизненный цикл неоспор и взаимоотношения их с организмом хозяина, очень схожи с таковыми при токсоплазмозе и саркоспоридиозе. Поэтому до 1984 года, например, трофозоиты неоспор, исследователи принимали за токсоплазм, а цисты размножения в скелетных мышцах промежуточных хозяев, за цисты саркоспоридий.
После открытия половой фазы развития у токсоплазм (Hutchison at all.1969, 1970; Frenkel at all, 1970; Галузо, 1970: Засухин, Акиншина 1972), а затем и у саркоспоридий (Fayer,1972; Rommel at all.1972) некоторые исследователи, особенно те, кто занимался изучением жизненных циклов и биологией кокцидий, всех паразитических простейших образующих в организме животных тканевые цисты размножения, стали включать в группу эймерид. Одни на уровне семейства, другие подсемейства, третьи на уровне родов. В научную литературу вошёл термин -«Цистообразующие кокцидии» и «классические и неклассические» кокцидии. Даже возбудители безноитиоза крупного рогатого скота Besnoitia besnoiti, которые не имеют половой фазы развития и размножения включены в подсемейство Isosporinae в семейства Eimeriidae (Бейер, 1978).
Обоснование неоспор, как отдельного вида паразитических простейших, послужило поводом к пересмотру некоторых вопросов эндогенного размножения токсоплазмид, их циркуляции в природе и места токсоплазмид в системе простейших. Это важно для понимания как проблемы неоспороза в целом, так и для лечения животных больных неоспорозом, поскольку для лечения неоспороза применяются те же препараты, что и для лечения токсоплазмоза и малярии. Поэтому, чтобы понять как действуют лекарственные препараты при указанных заболеваниях, важно вспомнить некоторые детали развития и размножения не только токсоплазмид, но и других кровепаразитов.
В печатных изданиях, и особенно, в Интернет сообщениях на русском языке, появилось большое количество публикаций о неоспорах и неоспорозе собак. Несмотря на это, глубинные процессы, происходящие при этом в организме животных не затрагиваются. Поэтому не только владельцы питомников собак, но и многие ветеринарные врачи стран бывшего Советского Союза слабо осведомлены, как об эндогенном цикле размножения неоспор и патогенезе заболевания, так и в целом о заболевании, вызываемом этими паразитами. Отсутствие надёжной и полной информации о неоспорозе собак нередко приводит не только к неправильному лечению животных, но и к различным погрешностям или невозможности полноценного естественного и искусственного осеменения собак и других представителей семейства псовых.
Имея в своём распоряжении уникальный полевой и экспериментальный материал по токсоплазмидам, неоспорам и бабезиозу собак, авторы провели сравнительный анализ морфологии и жизненных циклов токсоплазмид с неоспорами, а так же с некоторыми кровепаразитами. Полученный сравнительный анализ подтвердил правомерность нашего включения неоспор в отряд Toxoplasmida класса Spоrozа.
Основанием для данной работы послужили архивные материалы по изучению жизненного цикла токсоплазм и других токсоплазмид имеющихся в распоряжении авторов, а также материал собранный авторами при рутинной работе ветеринарной клиники Центра охраны здоровья животных доктора А. М. Бугаева в г. Киеве. Кроме того, в работе дан анализ основных достижений в изучении неоспор и токсоплазмид опубликованных учёными за последние 10 лет.
Примечание. Все фотографии, под которыми не указаны авторы взяты из архива Ассоциации ветеринарных врачей Казахстана и ветеринарной клиники Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева, г. Киева.
Цель публикации данной работы. На основании уникального собственного материала по токсоплазмидам, бабезиям и анализа данных опубликованных в открытой печати, авторы хотели показать молодым исследователям интересующимися паразитическими простейшими и практикующим ветеринарным врачам:
1. Неоспоры, как и токсоплазмиды заметно отличаются по эндогенному циклу развития, влиянию их на организм хозяина и циркуляции в природе, от так называемых «истинных или классических кокцидий» - эймерий. Поэтому, как и ранее академик И.Г. Галузо в своих выступлениях и работах утверждал, что токсоплазмы – это не кокцидии, так и мы на основании проведённых собственных исследований и анализа данных литературы считаем, что неоспоры тоже не кокцидии. Их место, как и других токсоплазмид, в отряде Toxoplasmida.
2. Неоспоры, по морфологическому строению, жизненному циклу и влиянию на организм животных очень похожи на токсоплазм. Изучение жизненного цикла неоспор показало, что при неоспорозе паразиты от животного к животному передаются как по горизонтали, так и вертикали – от матери потомству трансплацентарно, в течение нескольких поколений. При этом, клиническое проявление заболевания может наступить только во втором или третьем поколении. Важно отметить, что у взрослых животных в течение этого времени обнаруживаются только иммуноглобулины G.
3. Установление передачи неоспор, от матери своему потомству по вертикали, да ещё в ряде последовательных генераций, заставляет по новому обсудить вопрос трансплацентарной передачи токсоплазм от животного к животному, а так же от матери ребёнку во время беременности и влиянии токсоплазм на организм человека и животных при обнаружении в их крови иммуноглобулинов G.
4. Лечение неоспороза собак, как и токсоплазмоза собак и кошек кокцидиостатиками эффективно только при кишечной фазе развития паразитов. На внекишечные (трофозоиты, эндозоиты, мерозоиты, брадизоиты и цистозоиты) кокцидиостатики не действуют.
5.Наш практический опыт свидетельствует, что при токсоплазмозе и неоспорозе на внекишечные стадии развития паразитов, положительно влияет Бисиптол – 480 и Фансидар. Недостатки этих препаратов – бисиптол 480 плохо переносится кошками, а фансидар очень дорогой и поэтому не всем хозяевам животных доступен.
6. Применение Бисиптола - 480 и фансидара должно сопровождаться введением иммунокоректирующих препаратов. В ветеринарной клинике Центра охраны здоровья животных г. Киева разработаны несколько схем введения таких препаратов. ( Схемы лечения будут опубликованы нами на наших сайтах в статье «Лечение неоспороза», статья готовиться к печати).
ПРИМЕЧАНИЕ. В ветеринарную клинику Центра охраны здоровья животных 16 мая 2015 года обратилась женщина, на седьмом месяце беременности, с просьбой установить причину частых эпилептических припадков у семимесячного котёнка. Когда с помощью иммуноферментного анализа (анализ проведён в лаборатории БАЛЬД, гКиев) в крови выявили в больших титрах иммуноглобулины G (2,3 при норме 0,5), женщина с гордостью сказала - «Слава Богу, что у меня уже есть иммуноглобулины G к токсоплазмам и мне и моему ребёнку ничего не угрожает». А мы подумали, как так получилось, что врачи дошли до такого невежества, советуя людям и особенно беременным женщинам, что путём естественного заражения токсоплазмами можно приобрести иммунитет и защитить себя и своего ребёнка от токсоплазмоза.
Дорогие женщины! Защиты от воздействия токсоплазм на организм человека и животных на сегодняшний день нет. Иммунитет при токсоплазмозе нестерильный и наличие в крови иммуноглобулинов G свидетельствует только о том, что в вашем организме есть токсоплазмы. При любой фазе течения токсоплазмоза, даже при так называемом, «бессимптомном течении» токсоплазмы воздействуют на организм хозяина, или путём непосредственного влияния на органы и клетки, в которых они размножаются, или путём сенсибилизации организма. И, как токсоплазмы поведут себя в той или иной ситуации, зависит от многих факторов, и никто в мире не сможет предсказать исход такого паразитирования. А врачам медикам, которые по той или иной причине сталкиваются с проблемой токсоплазмоза, мы бы хотели посоветовать для начала прочитать книгу профессора Е.А.Шевкуновой – «История изучения токсоплазмоза в Советском Союзе», вышедшая в сет в 2006 году.
Терминология используемая в статье.
1. Токсоплазмиды - это строго ограниченная группа паразитических простейших - Toxoplasma, Besnoitia, Sarcocystis, Neospora, Frenkelia, Hammondia, которые паразитируют в организме многих видов диких и сельскохозяйственных животных, включая человека. Особенностью этих паразитов является то, что в их жизненном цикле имеется фаза бесполого КОЛОНИАЛЬНОГО развития в виде внеклеточных тканевых цист, со своими законами развития, размножения и обмена веществ между колонией паразитов и организмом хозяина. При этом, у одних токсоплазмид может отсутствовать половая фаза развития и размножения (Besnoitia besnoiti), у других - паразиты могут бесконечно долго циркулировать в природе, минуя половую фазу развития (Toxoplasma gondii, Neospora caninum). В отличие от эймерий, все токсоплазмиды - это, прежде всего, паразиты лейкоцитов и клеток РЭС, а затем уже клеток других тканей, в то время, как кокцидии это паразиты поверхностных эпителиальных клеток. Токсоплазмиды способны размножаться, как внутриклеточно (в цитоплазме и ядрах инвазированных клеток), так и внеклеточно; как путём эндодиогении и эндополигении, так и путём продольного деления и шизогонии (Якимов, 1931; Шустров, Хавкин,1968; Бугаев, Новинская, 1969; Галузо, Бугаев и др., 1974). Некоторые токсоплазмиды, такие как саркоспоридии и токсоплазмы, могут инвазировать и эритроциты ( Галузо, Коновалова, 1971; Ashlie Hartigana and all.,2009).
Фото взято из работы Ashlie Hartigana, 1, Bing Y. Zhua, 1, Damien P. Higginsa, Paul J. Canfielda, Jan Šlapetaa, опубликованной в журнале Veterinary Parasitology Volume 159, Issue 2, 5 February 2009, Pages 105–111, выполненая в Австралии. На фотографиях показаны саркоспоридии в эритроцинах.
Fig. 7. Intraerythrocytic parasite (Sarcocystidae; Coccidia; Apicomplexa) in thin blood film. Yellow-bellied glider (Petaurus australis) from Queensland (A–F) and New South Wales (G–I). Intraerythrocytic stages are elongate with an oval shape (A, C and H), some displaying a cylindrical outline (B). Centrally located nucleus is coarsely granular. Emerging parasites take elongated form (I), some with one an extended end (D). Before the emergence of these extracellular forms, the parasite starts to slightly elongate at both ends, with the erythrocyte revealing a piriform shape (E–H). The blood films were stained with Quick Dip (Fronine, Australia)
Для таких токсоплазмид, как Toxoplasma и Neospora характерным является, практически, два независимых цикла размножения - половой или кишечный, осуществляемый в организме дефинитивных хозяев и бесполый, осуществляемый в организме промежуточных хозяевах. Благодаря этому, они могут циркулировать среди диких и домашних животных, минуя половую фазу и таким образом поддерживать существование вида в природе без половой фазы развития (Галузо, 1974).
2. Неоспороз - это протозойное, природно- очаговое заболевание сельскохозяйственных, диких и мелких домашних животных вызываемое, микроскопическими, токсоплазмоподобными паразитическими колониальными простейшими относящимися к роду Neospora. Есть основания предполагать, что неоспороз может быть отнесён к зоонозам.
3. Неоспоры (Neospora caninum) - Одноклеточные микроскопические паразиты, поражающие многие виды млекопитающих (включая человека) и птиц. Несмотря на широкую заражённость животных неоспорами, тяжёлую патологию паразиты вызывают только в организме крупного рогатого скота и собак ( Dubey JP, Lindsay D,S.1996; Dubey J.P. 2003).
Эндогенный цикл неоспор изучен ещё не в полной мере. Установлено, что он протекает в организме промежуточных и дефинитивных хозяев. У неоспор, как и у токсоплазм, нет чёткого чередования фазы бесполого размножения в организме промежуточных и дефинитивных хозяев. Неоспоры могут длительно поддерживать вид в природе, минуя половую фазу размножения. При этом основной путь передачи паразитов является транспланцитарный, как по горизонтали, так и вертикали.(Dijkstra T,and all.,201).
В природе обнаружено два вида неоспор – Neospora caninum и Neospora hughesi. Если жизненный цикл N. caninum более или менее изучен, то в отношении жизненного цикла N.hughesi, практически нет никаких сведений. Имеются лишь сообщение АВТОРОВ, что N.hughesi, является причиной миэлита лошадей в Северной и Южной Америке, а так же в Иране (Gharekhani и ХейдариJ. Adv. Vet. Анимация. Res, 1 (4):. 228-231, декабрь 2014.
4. Трофозоит или тахизоит - это быстро размножающаяся стадия токсоплазмид. Тахизоиты могут размножаться как внутриклеточно, так и внеклеточно, как в цитоплазме клеток, так и в их ядрах ( Якимов, 1931; Акиншина, 1964, Акиншина Г.Т. , Засухин Д.Н.,1971; Бугаев, 1969, 2005, 2014). В стадию трофозоита обеспечивается быстрое увеличение числа паразитов в организме хозяина. Питание трофозоитов происходит за счёт гидролизированной структуры цитоплазмы инвазированной клетки или окружающей трофозоит ткани организма хозяина, если паразит находится внеклеточно (Бугаев, 2014).
5. Мерозоит - это стадия жизненного цикла паразитов образовавшихся в результате шизогонии.
6. Брадизоиты - это медленно, внеклеточно размножающие паразиты, формирующие тканевую цисту. По морфологии они бывают двух типов. Одни с центральным расположением ядер, другие с ядрами расположенными у тупого края, последние напоминают вид парашутика (Пак, 1974). Теоретически и практически, брадизоитами можно называть и паразитов находящихся внутри цист, поскольку паразиты в цисте продолжают медленно размножаться и после формирования оболочки вокруг колонии паразитов. Однако удобнее и понятнее, паразитов в сформировавшейся цисте называть цистозоитами, как это принято большинством исследователей.
В отличие от тахизоитов, по мере размножения и формирования колонии, в цитоплазме некоторых видов токсоплазмид, происходит постепенное накопление амилипектина, что меняет не только их морфологию, но и биологическое предназначение. Например, у брадизоитов Besnoitia besnoiti, расположенных на периферии колонии, накопленный в цитоплазме амилопектин, идёт на построение внутренней оболочки цистной стенки (Бугаев, 2014). Не исключено, что у неоспор в образовании оболочки цисты принимает участие, как гидролизированная ткать белого вещества головного мозга, так и амилопектин накопленный брадизоитами.
7. Инвазированная клетка – При остром течении токсопдазмоза, в гистологических срезах, мазках - отпечатках из органов, в мазках крови, в мезотелиальных клетках брюшины и плевры, клетках РЭС различных органов можно обнаружить множество инвазированных клеток (фото 1).
Фото 1.Уникальные фотографии демонстрирующие инвазию клеток РЭС токсоплазмами. Фотографии взяты из статьи Кирилла Стасевича «Токсоплазмы управляют поведением животных с помощью иммунной системы», опубликованной в Интернете 10 декабря 2012 года. Но, как указывает автор, фотографии принадлежат исследователям Каролинского института (Швеция).
Нередко клетки одновременно инвазируются несколькими трофозоитами, которые дают начало как бинарному, так и множественному делению (шизогонии). Результатом такой инвазии является гибель клетки и образование микронекрозов с многочисленными паразитами вокруг некротизированной ткани. Клетка инвазированная токсоплазмами и особенно множеством токсоплазм, никогда не превращается в псевдоцисту, она разрушается, а паразиты выходят в межклеточное пространство и дают начало новому поколению трофозоитов и мерозоитов (Фото 2).
Фото 2. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши погибшей на 5 сутки после внутрибрюшинного заражения вирулентным штамом токсоплазм CDN. Показана мезотелиальная клетка при одновременной множественной инвазии. Токсоплазмы находятся на разных стадиях бинарного и множественного деления. Большая часть токсоплазм делится путём расщепления шизонта. Вокруг каждой группы паразитов имеется своя паразитофорная вакуоль. Окраска по Романовскому - Гимза.
8. Псевдоциста - это одна из фаз внутриклеточного развития токсоплазмид, которая формируется только в клетках РЭС . Есть сообщения и документальные подтверждения, что псевдоцисты могут образовываться и у других паразитов относящихся к Подклассу Haemosporinа.
9. Тканевая циста токсоплазмид - это сферическая или продолговато – овальная, внеклеточная колония или расположенная внутри саркоплазмы мышечного волокна, медленно размножающихся бесполым путём паразитов, окружённая чётко контурированной оболочкой. Тканевая циста это не циста сохранения, это одна из фаз развития и размножения в эндогенном цикле паразитов (Пак, 1974). И не антитела, ни другие факторы организма хозяина на их формирование не влияют. Тканевые цисты, например, у токсоплазм образуются не только в организме животных и человека, но и в культуре клеток, где нет никаких антител(Gustavson at all., 1954; Hogan at all.,1960, 1961; Beverley,1969; Галузо, Коновалова, 1974; Baron S.1996).. Поэтому говорить, что тканевая циста образуется как результат защитных механизмов организма хозяина нет оснований. Циста - это одна из фаз развития и размножения токсоплазмид, это «кокон» или «дом» построенный самими паразитами за счёт материала организма хозяина. Грануляционная ткань организма хозяина при этом никакого участия не принимает
(Фото 3 -6).
Фото 3. Показаны тканевые цисты размножения токсоплазм в головном мозге экспериментально заражённой белой мыши. Цисты окружены тонкой базофильной оболочкой. Гистологический срез, окраска по Мак - Манусу.
Фото 4. Толстостенная циста неоспор в головном мозге двухгодичного роттвелера. Фото взято из работы Jackie Barber. Журнал Waltham 1998г. Электронный ресурс и режим доступа: www.sciencedaily.com/.../11021107.
Фото 5. Тканевые цисты размножения B.bеsnoiti в дерме коровы при естественном заражении. Окр. Гематоксилин – эозином.
Фото 6. Тканевые цисты размножения саркоспоридий. Гистологический срез миокарда правого желудочка зебу. Окр. Железным гематоксилином и эозином.
10. Цистозоиты – это медленно размножающие паразиты, находящие внутри цисты. Термин, цистозоит указывает на место нахождения паразита и может быть применим, когда необходимо подчеркнуть, что брадизоит находится в хорошо сформированной цисте. Цистозоиты и брадизоиты отличаются от тахизоитов или трофозоитов, как темпами размножения, так и содержанием в их цитоплазме амилопектина. Если в цитоплазме трофозоитов токсоплазм преобладает РНК, то в брадизоитах амилопектин. В последние годы установлено, что трофозоиты отличаются от брадизоитов и по антигенной структуре.
11. Амилопектин – Один из основных полисахаридов крахмала, состоящий из разветвлённых цепочек молекул глюклзы. Он служит главным питательным и структурным материалом для токсоплазмид, особенно в фазу образования псевдоцист и тканевых цист размножения. Роль амилопектина в разных стадиях развития токсоплазмид точно не установлена. Если у токсоплазм и безноитий, по мере их внутриклеточного размножения, амилопектин накапливается в цитоплазме паразитов и максимум его отмечается в брадизоитах и цистозоитах, то у саркоспоридий формирующих цисту или находящихся в цистах амилопектин отсутствует.
12. Оболочка цист токсоплазмид – это сложно организованная внеклеточная структура колонии паразитов, обеспечивающая, с одной стороны, защиту цистозоитов от агрессивного воздействия макроорганизма и с другой - способствующая питатанию многотычячной колонии паразитов. Оболочка цист у токсоплазмид образуется тремя путями:
Первый – это трансформация материнской оболочки паразита в оболочку цисты при эндодиогении, эндополигении и шизогонии;
Второй – это формирование оболочки из гидролизированных тканей организма хозяина и амилопектина самих паразитов;
Третий – часто наблюдаемый у Besnoitia besnoiti - это трансформация ядерной оболочки (ядерной псевдоцисты) в оболочку цисты.
Особо необходимо подчеркнуть, что грануляционная ткань к оболочкам цист токсоплазмид никакого отношения не имеет. Поэтому оболочку цист токсоплазмид лучше не называть капсулой. Поскольку термин «капсула» в организме животных подразумевает образование соединительнотканного происхождения. Например, капсула вокруг небольшого инородного тела или соединительнотканная капсула вокруг личинок гельминтов (халикозы), или соединительнотканная капсула вокруг первичного туберкулёзного очага и т.д.
13. Зигоциста – это неспорулированная зигота. Зигоцисты, образуются после половой фазы размножения токсоплазмид в эпителии тонкого отдела кишечника, представителей семейства псовых и кошачьих, а затем вместе с калом выделяются во внешнею среду (Фото 7 - 8).
Фото 7. Показано больше количество зигоцист токсоплазм в кале экспериментально заражённого котёнка через 3 минуты после выделения их из кишечника.
Фото .8. A. Unsporulated oocyst (arrow) with a central undivided mass in the feces of a dog (unstained). Bar, 10 μm. Фото взято из работы Dubey and all, 2007.
Фото. 8. B.Показаны зигоцисты (ооцисты) неоспор в кале двухмесячного щенка через 30 минут после их выделения во внешнею среду, естественное заражение.(Фото авторов).
Зигоцистами заразиться не может ни человек, ни животные, они не инвазионные (не заразные) образования. В них ещё нет спорозоитов, которые должны образоваться при споруляции, во внешней среде. Термин зигоциста для токсоплазм ввёл академик И.Г.Галузо, чтобы подчеркнуть разницу между токсоплазмами и кокцидиями. Однако этот термин правомерно может применяться и для других паразитов образующих изоспоры. Зигоцисты во внешней среде, при хорошем доступе кислорода спорулируют, становятся инвазионными (заразными).
14. Изоспора – это спорулированная зигоциста. В результате споруляции в зигоцисте токсоплазмид образуется две споры с четырмя спорозоитами в каждой (фото 9, А-В). Изоспоры образуются, как во внешней среде при хорошем доступе кислорода и достаточной влажности воздуха (Toxoplasma), так и в кишечнике без доступа кислорода (Sarcocystis). В некоторых работах приводятся данные, что изоспоры токсоплазм, например, образуются через 5 – 6 часов - это может связано с плохой аэорацией зигоцист. В нормальных домашних и природных условиях споруляция начинается уже через 15 – 20 минут. Учитывая такую скорость споруляции зигоцист токсоплазм, для собственной безопасности, кал кошек необходимо убирать как можно быстрее .
Фото 9. А.Показана изоспора неоспор в кале двухмесячного щенка на вторые сутки после их выделения во внешнею среду. (Фото авторов)
Фото.9. B. Sporulated oocyst (arrow) with two internal sporocysts (unstained). Bar, 10 μm. Фото взято из работы Dubey and all, 2007.
У саркоспоридий в отличие от токсоплазм и неоспор образование зигоцист и их споруляция происходит не в эпителии ворсинок кишечника представителей семейства псовых, а под эпителием в гладко - мышечных волокнах lamina propria. В результате споруляции в зигоцисте образуется две споры по четыре спорозоита в каждой. Оболочка вокруг изоспор очень тонкая и часто разрывается. Поэтому во внешнею среду, вместе с калом, чаще выделяются не изоспоры, а уже отдельные инвазивные (заразные) споры (Фото 10 -11).
Фото 10. Показана спора саркоспоридий S. Cruzi.
Фото взято из статьи опубликованной на сайте: Электронный ресурс и режим доступа: http://www.vetnext.com/search.php?s=aandoening&id=73291783159%20307
Фото 11. Показана группа спор саркосоридий.
Фотография взята из книги Encyclopedia of Parasitology, 2008. Editors: Heinz Mehlhorn Dr.
ISBN: 978-3-540-48994-8 (Print) 978-3-540-48996-2 (Online). Электронный ресурс и режим доступа:
15. Трансмиссивный механизм передачи инфекции — механизм передачи инфекции, при котором возбудитель инфекции находится в кровеносной системе и лимфе, передается при укусах специфических и неспецифических переносчиков: укусе кровососущего членистоногого (насекомого или клеща).
16.Фекально-оральный механизм передачи инфекции — механизм передачи инфекции, при котором локализация возбудителя инфекции преимущественно в кишечнике определяет его выведение из зараженного организма с испражнениями (фекалиями, мочой) или рвотными массами. Проникновение в восприимчивый организм происходит через рот, главным образом при заглатывании загрязненной воды или пищи, после чего он вновь локализуется в пищеварительном тракте нового организма.
17.Трансплацентарный путь передачи инфекции — при котором возбудитель инфекции передается от матери к плоду во время беременности.
Горизонтальный путь передачи - это передача возбудителя от животного к животному или человека человеку при выходе его во внешнею среду, с последующем попаданием его в другой организм. Это, так называемый, классический путь передачи возбудителя. Он свойстенен подавляющему большинству инфекционных и инвазионных заболеваний. При этом факторы внешней среды играют активную роль.
в. Вертикальный путь передачи – Это передача возбудителя от родителей потомству без выхода его во внешнюю среду через:
· генетический аппарат.
· плаценту.
· трансовариально.
· с молоком.
· при травмах родовых путей.
При этом возбудитель непосредственно во внешнюю среду не выделяется и факторы ее существенного влияния не оказывают. Вертикальный путь передачи характерен в основном для вирусных инфекций, возбудители которых слабо устойчивы и быстро погибают вне организма (лейкоз, микоплазмозы, пуллороз птиц), а так же для неоспороза.
Примечание: Боле подробно о терминологии токсоплазмид вы сможете прочитать в нашем пособии.
«ТОКСОПЛАЗМОЗ МЕЛКИХ ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ - МИФЫ И ФАКТЫ»
Общие Сведения о Неоспорах и Токсоплазмидах.
Генетически, морфологически и цитохимически неоспоры, сходны с паразитами входящими в группу токсоплазмоподобных паразитических простейших. Поэтому долгое время трофозоиты неоспор принимали за токсоплазм, а тканевые цисты, обнаруживаемые в скелетных мышцах крупного рогатого скота и других животных относили к саркоспоридиям. На значение, неоспор как возбудителя неоспороза собак, впервые указали в 1984 году Bjerkas, Mohn, and Presthus. Они описали это заболевание у боксера в Норвегии и дали морфологическую характеристику трофозоитам, тканевым цистам и изоспорам на уровне светового микроскопа. Затем их данные были подтверждены в США. В 1988 году исследователи из Америки DUBEY, J. P., J. L. CARPENTER, C. A. SPEER изучили заболевание у 10 собак, выделили возбудителя и назвали его Neospora caninum. Они подробно описали не только морфологию неоспор под световым микроскопом, но и изучили субмикроскопическое строение трофозоитов и брадизоитов.
Считается, что морфологически и филогенетически неоспоры сходны с Toxoplasma gondii и другими токсоплазмидами. В доступной нам литературе мы не нашли схематического изображения трофозоитов неоспор, однако, опубликованные фотографии DUBEY, J. P., A. L. HATTEL, D. S. LINDSAY, M. S. TOPPER (1988) субмикроскопического строения трофозоитов неоспор показывают, практически, полное сходство их с трофозоитами токсоплазмам и другими токсоплазмидами. Чтобы напомнить читателям о сложной организации паразитических простейших отряда Toxoplasmida, мы приводим схему - рисунок Маркун Татьяны Андреевны опубликованную в прекрасно иллюстрированной статье, изданную на русском языке, под названием «Класс споровики». Статья появивилась в Интернете 9 марта 2015 года. На схеме, на наш взгляд, хорошо показаны все морфологические особенности трофозозоитов токсоплазм, как на клеточном, так и субмикроскопическом уровне.
Схема – рисунок трофозоитов токсоплазм выполненная Т.А.Маркун.
Схема взята из работы Маркун Т.А. - «класс споровики», Электронный ресурс и режим доступа-
http://bono-esse.ru/blizzard/A/Posobie/Bio/sporoviki.html
Как видно из схемы, электронно - микроскопическое строение трофозоитов паразитов этого отряда очень сложное. Наряду с ядрами, лизосомами, митохондриями и аппаратом Гольджи, которые входят в структуру всех живых клеток, у токсоплазмид на переднем конце хорошо видны полярные кольца, коноид, роптрии, микронемы и субпелликулярные микротрубочки. Н.Д.Левайн(Levine,1970) сравнив субмикроскопическое строение паразитических простейших класса Sporozoa, обнаружил в них общие черты надклеточного уровня организации, обосновал термин «апикальный комплекс» и на основании этого выделил в типе простейших подтип Apicomplexa. В отношении низших таконов в этом подтипе ещё идут уточнения и дискуссии.
Для определения систематического положения неоспор мы сравнили морфологию и биологию неоспоро с таковыми токсоплазм, саркоспоридий и некоторыми паразитическими простейшими разных отрядов подкласса Haemosporinа.
Морфология Трофозоитов Неоспор и Токсоплазмид.
Сравнительный анализ морфологии трофозоитов неоспор и токсоплазмид, на светооптическом уровне, выявляет ряд идентичных структур в строении паразитов, как в интерфазом состоянии, так и при внутриклеточном и внеклеточном их делении (Фото 12 -18).
Фотох 12. Показаны трофозоиты Neospora caninum в лимфоцитах собаки. Хорошо можно видеть, что трофозоиты имеют полулунную и продолговато - овальную форму. Ядра их расположены в центре клетки или у одного из полюсов тела паразита. Фото взято из работы Jackie Barber. Журнал Waltham 1998г.
Электронный ресурс –Режим доступа: www.sciencedaily.com/.../11021107
Фото 13. Показаны трофозоиты токсоплазм в пластинчатом препарате брыжейки белой мыши при экспериментальном внутрибрюшинном запаржении мышки вирулентным штаммом токсоплазм CDN. Видны полулунные, продолговато – овальные и грушевидные паразиты. У одной пары паразитов передние края соеденены тонкой, базофильной перемычкой (показано стрелкой). Окраска по Романовскому - Гимза с докраской метиленовым синим.
Микрофото 14. Мазок крови котёнка погибшего от острого приобретённого (неэкспериментального) токсоплазмоза. Стрелкой показана группа свободных, внеклеточных трофозоитов токсоплазм в крови котёнка. Окраска с помощью набора Лейкодиф.
Фото 15. Tachyzoites in Bone Marrow.
На фотографии показана группа внеклеточных тахизоитов токсоплазм среди клеток красного костного мозга. Отдельные морфологические структуры тахизоитов свидетельствуют о внеклеточном делении токсоплазм (показано стрелками).
Электронный ресурс и Режим доступа:
http://www.med-chem.com/para-site.php?url=org/toxogond
Обычно, при окраске препаратов по Романовскому – Гимза ядрышки в трофозоитах токсоплазм не видны, однако при специальных окрасках хорошо различаются как ядра трофозоитов, так и нуклеолы.
Фото16. . Показаны трофозоиты безноитий крупного рогатого скота (Besnoitia besnoiti) в мононуклеарах и нейтрофилах перитонеального экссудата белых мышей при экспериментальном их заражении(фиг. В, С,D, Е) , а так же розеткоподобная псевдоциста в гистологическом срезе лёгкого мыши (F) и свободные тахизоиты в очаге кровоизлияния в лёгком.
Fig. 1. Besnoitia besnoiti in a skin biopsy from an infected bull (Animal 70) (A) and in material of an infected γ-interferon knockout mouse (K122) (B–G). (A) Numerous cystozoites (<) are released from tissue cysts (*) in bovine skin after squashing using a mortar and pestle. (B) Peritoneal washing of the B. besnoiti infected γ-interferon knockout mouse with numerous extra- and intracellular tachyzoites (<), Giemsa stained. (C–E) Parasites were observed in blood smear of the GKO mouse (Giemsa stained), either in monocytes (C, <), or in neutrophil granulocytes (D, >) or extracellular (E, <) 5 days post-infection. (F) Parasitophorous vacuole containing B. besnoiti tachyzoites arranged as a rosette (<) in a lung section of the infected GKO mouse, H&E staining. (G) Cluster of tachyzoites (>) in a blood vessel of the liver of the GKO mouse, H&E staining.
Трофозоиты неоспор морфологически сходны не только с токсоплазмами и другими токсоплазмидами, но и с трофозоитами кровепаразитов (фото 17 - 18).
Фото 17. Показаны внеклеточные и внутриклеточные трофозоиты Babesia canis. Трофозоиты, которые видны вне клеток морфологически сходны с трофозоитами неоспор и токсоплазм. Большая часть из них имеют продолговато – овальную, полулунную или грушевидную форму. Наряду с этим хорошо видны мелкие, внеклеточные паразиты, округлой формы, размером 0,2 – 0,3 микрона в диаматре. В них хорошо различется базофильное ядро и оксифильная цитоплазма- Белая стрелка.(Архив Центра охраны хдоровья животных доктора А.М.Бугаева г.Киев).
Фото 18. Мазок крови из уха овчарки, возраст 5 лет. Естественное заражение собаки Babesia canis в пригороде Киева, апрель 2015 год. Показаны полулунные и продолговато – овальные внеклеточные трофозоиты (чёрная стрелка). Так же видны внутриэритроцитарные бабезии в виде мальтийского креста (белая стрелка) и бабезии делящиеся бинарно (широкая белая стрелка).
Морфология Тканевых Неоспор и Токсоплазмид.
Морфологическое строение тканевых цист неоспор резко отличается от тканевых цист токсоплазм, как внутренним содержимым, так и толщиной стенки цист. По своей морфологической структуре тканевые цисты неоспор больше похожи на тканевые цисты безноитий КРС. Как у цист безноитий, так и цист неоспор нет внутренних перегородок (септ). Стенка цист неоспор по своему строению –толщине, наличию внутренних мембран, так же сходна со стенкой цист безноитий, и заметно отличается от таковой у токсоплазм (Фото 19 и 20- А, В).
Фото 19. Гистологический срез коры головного мозга белой мыши убитой через 20 суток после экспериментального заражения. Показана типичная, внеклеточная, хорошо сформировавшаяся циста токсоплазм, с чётко видимой тонкой базофильной оболочкой. Цитоплазма брадизоитов даёт интенсивную реакцию на нейтральные мукополисахариды. Окр. По Мак - Манусу.
А В
Фото 20. А. Гистологический срез дермы коровы при хроническом безноитиозе. Показана хорошо сформированная внеклеточная циста B.bеsnoiti с множеством внутри брадизоитами. Окр. Гематоксилин – эозином. (Фото авторов).
Фото 20.В. На фотографии видна, толстостенная циста неоспор в головном мозге двухгодичного роттвелера. Фото взято из работы Jackie Barber. Журнал Waltham 1998г. Электронный ресурс –Режим доступа: www.sciencedaily.com/.../11021107
Сравнивая морфологическое строение стенки цист неоспор можно заметить, что она также больше похожа на стенку тканевых цист безноитий КРС. Как у неоспор, так и в стенке цист B.bеsnoiti можно чётко различить три слоя – внутренний, средний и наружный(Фото 21 - 23).
Фото 21. Показана циста неоспор в головном мозге двухгодичного роттвелера. Хорошо просматривается трёхслойная оболочка тканевой цисты. Фото взято из работы Jackie Barber. Журнал Waltham 1998г. Режим доступа:www.sciencedaily.com/.../11021107
Фото 22. Деталь фото Х. Показана трёхслойная стенка тканевой цисты неоспор. Хорошо виден средний, светлый слой стенки цисты, который внутри отделяется от колонии брадизоитов тонкой мембраной(внутренней оболочкой), а с наружи более толстым и рыхлым слоем отделяющим цисту от окружающего белого вещества головного мозга.
Фото 23. Гистологический срез зрелой, хорошо сформировавшейся безноитиозной цисты коровы. Спонтанное заражение. Хорошо видна трёхслойная стенка цисты B.besnoitia. Окраска по Мак - Манусу, ув.
По –видимому, такие морфологические особенности тканевых цист неоспор и безноитий не случайны. У токсоплазм и безноитий хорошо изучены, как гистохимические особенности тканевых цист, так и ультратонкое строение их стенок и брадизоитов. Эти особенности отражаются как на обмене колонии тканевой цисты с окружающей тканью - головным мозгом, миокардом, скелетной мускулатурой и дермой (Бейер, 1978), так и на специализации брадизоитов (Бугаев и др. 2005.). В отношении неоспор такие данные пока отсутствуют.
В связи с этим, особо необходимо подчеркнуть, что в эндогенном цикле размножения токсоплазм и безноитий крупного рогатого скота имеются внутриклеточные и внеклеточные фазы развития. Например, в головном мозге тканевые цисты токсоплазм образуются только внеклеточно и токсоплазмы никогда не инвазируют нейроны (Бугаев, 2005). В то время, как многие исследователи((Cummings и др, 1988;. Dubey др, 1988;. Bjerkas и Presthus, 1989; Dubey и Линдси, 1989b; Speer и Dubey, 1989) изучавшие морфологию, эндогенный цикл размножения неоспор и их взаимоотношение с организмом хозяина, обнаруживали неоспор в нейронах, швановских клетках, и эпендимных клетках головного мозга.
Таким образом, у токсоплазм, в эндогенном цикле размножения и развития, чётко различается несколько морфологических форм паразитов - трофозоит, псевдоциста и тканевая циста размножения. Каждая из этих стадий, имеет свои морфологические и цитохимические особенности, а так же своё биологическое назначение в жизненном цикле паразита. Не исключено, что и у неоспор есть такие стадии развития паразитов. Сравнивая данные морфологического и цитохимического исследавания брадизоитов (цистозоитов) неоспор опубликованные в открытой печати, с данными наших исследований, можно заключить, что морфологическая и биохимическая структура тканевых цист брадизоитов неоспор сходна с таковой безнотий КРС, а не с цистозоитами саркоспоридий. Отсюда можно предположить, что формирование стенки тканевых цист неоспор может быть сходно с таковым у безноитий, описанного нами в статье «Безноитиоз КРС» (подробно см. в безноитиозе КРС на нашем сайте).
Анализируя опубликованные фотографии по неоспорам, приходится констатировать, что многие авторы не различают в эндогенном цикле размножения неоспор стадию «псевдоцисты». Да и у токсоплазм, некоторые исследователи не выделяют псевдоцисты в отдельную фазу развития паразитов, а принимают любую внутриклеточною колонию паразитов за тканевые цисты. Хотя между псевдоцистой и тканевой цистой есть существенные различия. Во – первых, у токсоплазм и других токсоплазмид псевдоциста - это внутриклеточное колониальное образование, часто образующееся в клетках РЭС. У безноитий крупного рогатого скота псевдоцисты, наряду с клетками РЭС, нередко образуются в ядрах гладкомышечных клеток (фото 24).
Фото 24. Гистологический срез кожи бычка спонтанно зараженого токсоплазмоподобным паразитическим простейшим Besnoitia besnoiti. Показаны ядерные – псевдоцисты из гладкомышечных клеток. Вокруг псевдоцист видна широкая зона гидролизированной окружающей ткани - гладкомышечных волокон и ядер воспалительного инфильтрата. Окраска железным гематоксилином и эозином.
Формируются псевдоцисты из одной паразитарной клетки проникшей в цитоплазму или ядро клетки организма хозяина (Фото 25). В то время как тканевая циста токсоплазмид – это чаще внеклеточное, колониальное образование.
Фото 25. Гистологический срез печени щенка, экспериментально заражённого вирулентным штаммом токсоплазм CDN. Показана типичная псевдоциста в клетке Купфера. В цитоплазме большое количество паразитов, а ядро прижато к оболочке клетки. (Показано широкой стрелкой). В расширенных межбалочных капиллярах видны свободные трофозоиты (Показано чёрными стрелками). Окр. Железным гематоксилином и эозином.
Если сравнивать эндогенное размножение и развитие кровераразитов, относящихся к разным отрядам и даже классам с токсоплазмидами, то так же можно заметить, что у некоторых кровепаразитов, типичные псевдоцисты формируются в клетках РЭС в преэритроцитарную фазу развития (фото 26 - 27).
Фото 26. Показана типичная псевдоциста в эндотелиальной клетке почки (клетке РЭС) при экспериментальном пироплазмозе собаки. (Bone marrow, dog, experimental case. Smear. Many zoites are found in the cytoplasm of an endothelial cell. Panoptic. Bar = 4.5 μm).
Фотография взята из работы Alexandre Paulino Loretti, и Severo Sales Barrosb «Hemorrhagic disease in dogs infected with an unclassified intraendothelial piroplasm in southern Brazil», опубликованной в 2005 году в Бразилии.
Фото 27. Псевдоциста в макрофаге красного костного мозга при тейлериозе. Естественное заражение.
Электронный ресурс и режим доступа:
http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php?term=Theileria+annulata&lang=1
Формирующие у кровепаразитов колонии мерозоитов в стадию эритроцитарного развития, морфологически также сходны с таковыми в клетках РЭС, поэтому их можно называть псевдоцистами. (фото 28 - 30).
Фото 28.А.Plasmodium Falciparum Фото28.В. Plasmodium vivax (schizont).
Показаны псевдоцисты малярийных плазмодиев в эритроцитах человека.Электронный ресурс и режим доступа: http://www.parasitologie.nl/index.php?id=429.
Фото 29. Показаны разные стадии развития псевдоцист малярийных плазмодиев в эритроцитах человека.
Электронный ресурс и режим доступа:
https://www.google.com.ua/search?q=morfologia+plasmodium+malariae++in+man&rlz=1C1VASU_enUA549__596&
Разница заключается лишь в том, что псевдоцисты кровепаразитов, в эритроцитарную фазу развития, образуются не в клетках РЭС, а в эритроцитах. Как в клетках РЭС, так и в эритроцитах паразиты проходят одну из фаз своего развития, после чего оболочка клетки хозяина разрушается и паразиты покидают псевдоцисты. У токсоплазмид, затем следует стадия формирования тканевых цист размножения в том же организме, только в других тканях - головном мозге, скелетных мышцах, миокарде и дерме. Кровепаразиты, после стадии псевдоцисты в эритроцитах, покидают не только эритроциты, но и организм млекопитающих для прохождения фазы полового развития и размножения в организме уже кровососущих насекомых.
Фото 30. Мазок крови из уха собаки. Показаны разные стадии развития и размножения B.canis(чёрные стрелки) в эритроцитах периферической крови собаки заразившейся бабезиями в естественных условиях. г. Вышгород, Киевская область, март 2015 год. Белыми стрелками показны стадии образования эритроцитарных псевдоцист.
Мерозоиты в эритроцитарных псевдоцистах отличаются от трофозоитов образующихся простым бинарным делением, как морфологически (размерами, стадиями деления ядер и формой), так и количеством трофозоитов в одном эритроците(фото31).
Фото 31. Мазок периферической крови собаки из Вышгорода, пригород города Киева. Показаны восемь трофозоитов образовавшихся путём простого бинарного деления. Паразиты имеют грушевидную форму и свободно располагаются в цитоплазме эритроцита.
Таким образом, сравнительный анализ эндогенного размножения и развития токсоплазмид и кровепаразитов свидетельствует, что у кровепаразитов также имеется фаза развития и размножения паразитов в виде псевдоцист. Поэтому термин «псевдоциста» имеет право на своё существование среди паразитических простейших, относящихся к разным отрядам подкласса Haemosporinа.
Сравнивая деление неоспор с другими токсоплазмидами и в частности с токсоплазмами, на светооптическом уровне, также можно заметить много общих морфологических форм, которые свидетельствуют не только о единной морфологической структуре трофозоитов и брадизоитов, но и о единых способах деления и развития этих паразитов (фото 32).
Фото 32. Life cycle stages of Neospora caninum. (A) Impression smear of the liver of an experimentally infected mouse depicting numerous tachyzoites (Giemsa stain). Notice that the tachyzoites vary in dimension, depending on the stage of division: (a) a slender tachyzoite, (b) a tachyzoite before division, and (c) three dividing tachyzoites compared with the size of a red blood cell (arrow).
Показаны разные морфологические формы неоспор в мазках - отпечатках печени белой мыши экспериментально заражённой тканевыми цистами неоспор . На фотографии можно видеть полулунные паразиты, имеющие форму груши или банановидную (белые стрелки). Хорошо видны так же разные фазы бинарного и множественного (шизогония) деления неоспор (чёрные стрелки).
Фото взято из работы J.P.Dubey and all. опубликованной в журнале – Clin Microbiol Rev.2007 Apr; 20(2); 323-367. Электронный ресурс и режим доступа: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1865591/
Морфологические структуры неоспор в печени при экспериментальном заражении белых мышей показанные на фотографии номер 32, сходны с таковыми у вирулентного штамма токсоплазм CDN описанные нами ( А.Бугаев, В. Новинская) в брыжейке белых мышей при внутрибрюшинном их заражении и доложенных на третьем Международном Конгрессе протозоологов, проходившем в 1969 году в Ленинграде, а затем более детально описанных И.Г.Галузо, А.М.Бугаев и др.,(1974) в книге Жизненный цикл токсоплазм (Фото 33 ).
А В
Фото 33 А. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши убитой через 6 часов после внутрибрюшинного заражения трофозоитами вирулентного штамма токсоплазм CDN. Показаны различные фазы продольного деления токсоплазм расположенных в цитоплазме мезотелиальной клетки. Окр. по Романовскому –Гимза.
Фото 33. В. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши убитой через 21 час после заражения. В цитоплазме мезотелиальных клетках видны трофозоиты находящиеся на разных стадиях продольного деления и шизогонии. Окр. по Романовскому –Гимза.
В связи с сопоставлением способов деления неоспор с другими паразитическими простейшими следует вспомнить работу J.P. Dubey and J.K. Frenkel (1972), которые описали особый способ множественного деления токсоплазм в кишечнике котят и назвали такой способ деления - расщиплением ( spliting) материнской клетки на несколько мерозоитов.
Сам процесс «расщипления» шизонта ещё слабо изучен, но он встречается как при кишечном цикле размножения токсоплазм в организме дефинитивного хозяина, так и в организме промежуточных хозяев. (фото 34 ).
Фото 34. Мазок - отпечаток слизистой оболочки подвздошной кишки котёнка на 6 сутки после скармливания ему головного мозга содержащего цисты токсоплазм. Показано деление шизонта путём расщипления материнской клетки (чёрная стрелка). Рядом виден «овал» с центрально расположенным ядром(показано белой стрелкой). Окраска по Романовскому - Гимза. (Фото авторов).
Нами (Бугаев, Новинская, 1969) процесс «расщипления» шизонтов токсоплазм был прослежен в мезотелиальных клетках брыжейки белых мышей заражённых экспериментально вирулентным штаммом CDN (Фото 35 – 37).
Фото 35. Пластинчатый препарат белой мыши убитой через 30 часов после заражения. В цитоплазме мезотелиальной клетке видно «расщепление» шизонта на мелкие остроконечные мерозоиты (Показано стрелкой). Рядом видна колония токсоплазм образовавшаяся, по - видимому, путём, эндодиогении (чёрная стрелка). Окр. По Романовскому – Гимза.
Фото 36. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши через 28 часов после экспериментального заражения вирулентным штаммом CDN. Видны разные фазы эндомерогонии(внутреннего почкования) и момент отделения дочерней клетки токсоплазм от материнской клетки (Показано стрелкой). Окр. По Романовскому -Гимза.
Фото 37. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши убитой через 25 часов после внутрибрюшинного заражения вирулентным штамом токсоплазм CDN. Показаны разные стадии эндомерогонии и образования мерозоитов путём «расщипления» шизонта . Окр. По Романовскому – Гимза.
Следует особо подчеркнуть, что по мере нарастания инвазиии мезотелиальных клеток токсоплазмами, увеличивалось количество паразитов делящихся путём «ращипления» и в последние дни жизни белых мышей такое размножение было преобладающим(Фото 38 - 39).
Фото 38. Пластинчатый препарат белой мыши убитой через 30 часов после экспериментального заражения вирулентным штаммом токсоплазм. Показаны разные стадии формирования шизонтов и их деление путём «расщепления», путём эндомерогонии. Окр. По Романовскому – Гимза.
Фото 39. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши через 46 часов после заражения. Показан распад шизонта путём расщипления (Стрелка). Окраска по Романовскому - Гимза.
Мы приводим наши данные полученные при изучении эндогенного размножения токсоплазм, в связи с тем, что такой тип деления паразитов (spliting) имеет место и у других паразитических простейших. Так, подобный способ образования мерозоитов мы наблюдали у Babesia canis (фото 40 - 43).
Фото 40. Мазок крови из уха щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) . Белыми стрелками показан момент деления паразита путём «расщипления» материнской клетки.(Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 41. Мазок крови щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) в пригороде Киева(г.Вышгород). Белыой стрелкой показан момент деления паразита путём «расщипления» материнской клетки.(Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 42. Мазок крови из уха йркширского терьера, заразившегося в естественных условиях г. Киева. Возраст 9 лет, поступил в клинику 6 мая 2015 года. Показана начальная стадия деления ядра бабезии в эритроците, путём «расщипления». Ядро имеет продолговато – овальную форму (показано стрелкой).
Фото 43. Мазок крови щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) в пригороде Киева(г.Вышгород).
Белыой стрелкой показан момент деления продолговато – овального ядра на отдельные хроматиновые глыбки перед «расщиплением» материнской клетки.(Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 44. Мазок крови щенка. Естественное заражение Babesia canis в пригороде Киева(г.Вышгород). В цитоплазме двух эритроцитов видны стадии образования эритроцитарных псевдоцист путём «расщипления» материнской клетки (белые стрелки). Чёрными стрелками, показаны внеклеточные трофозоиты бабезий. В цитоплазме лимфоцита видно большое количество мелких пикноморфных паразитов (белая широкая стрелка). (Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 45. Мазок крови щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) . В центре фотографии видна формирующаяся эритроцитарная псевдоциста, путём «расщипления» делящихся трофозоитов. (Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 46. Мазок крови из уха овчарки 5 лет. Естественное заражение собаки в пригороде Киева, 12 апрелля 2015 года. Показано внутриэритроцитарное множественное деление бабезий путём «расщипления» трофозоитов (белая стрелка) и внутриэритроцитарный мальтийский крест(чёрная стрелка).
В мазках, приготовленных из периферической крови собак больных бабезиозом, обнаруживались гипертрофированные лимфоциты и моноциты, в цитоплазме которых обнаруживались бабезии. Однако нам не удалось уточнить, паразиты в цитоплазме лимфоцитов и моноцитов проходят стадию своего развития и размножения или подвергаются в лейкоцитах уничтожению. Судя по общей картине инвазионного процесса и сравнивая стадии размножения токсоплазм в лейкоцитах, мы полагаем, что это фагоцитированные бабезии, которые впоследствии, в цитоплазме лимфоцитов и моноцитов, подвергаются уничтожению – лизису (Фото 44).
Фото 47.Показан гипертрофированный лимфоцит, в цитоплазме которого видны лизирующие бабезии.
На основании общего субмикроскопического строения паразитических простейших и особенно передней их части, Н.Д.Левайн(1970) в типе простейших выделил подтип Apicomplexa и ввёл в научную литературу термин «апикальный комплекс». Значение этого комплекса для паразитов в научной литературе ещё обсуждается, поэтому интересно отметить, что он перед началом деления, особенно шизогонии, оделяется и лизируется. Этот процесс можно наблюдать у паразитов, относящихся к различным отрядам кровепаразитов. Причём отделение апикального комплекса можно наблюдать, как при внутриклеточном, так и внеклеточном их размножении. Такой процесс нами был подробно прослежен на примере токсоплазм(фото 45 ).
Фото 48. Мазок из перетонеального экссудата белой мыши павшей на 6 сутки после внутрибрюшинного заражения вирулентным штаммом CDN. Видны свободные трофозоиты токсоплазм, имеющие различную морфологическую форму. Хорошо видно отделение передней части трофозоита. Окр. по Романовскому – Гимза с докраской метиленовым синим.
Отделение передней части паразита часто мы наблюдали при начале множественного деления паразитов, деления пуьём шизогонии(фото 46).
Фото 49. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши убитой через 28 часов после внутрибрюшинного заражения вирулентным штаммом CDN. На фотографии показаны два округлой формы шизонта, у одного из которых виден редуцирующийся передний участок тела трофозоита (белая стрелка). Окр. по Романовскому –Гима.
Сходное отделение передней части паразита мы наблюдали и у бабезий собак при естественном заражении (фото 47 - 50).
Фото 50. Мазок перифирической крови щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) . Показан момент отделения коноида бабезии находящейся в эритроците щенка.(Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 51. Мазок крови щенка. Естественное заражение щенка Babesia canis . Показан момент отделения передней части тела у двух бабезий находящихся в эритроците щенка перед образованием кольцевидных форм.(Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 52. Мазок крови щенка. Естественное заражение бабезиозом(Babesia canis) . Показан момент отделения передней части у внеклеточного трофозоита. Архив Центра охраны здоровья животных доктора А.М.Бугаева,г.Киев).
Фото 53. Мазок из уха собаки овчарки, возраст 5 лет, пригород г.Киева. Естественное заражение Babesia canis. Перед образованием кольцевых форм паразитов хорошо видно отделение передней части тела (белые стрелки). Чёрными стрелками показаны кольцевидные формы бабезий.
Таким образом, сравнителный анализ трофозоитов разных отрядов подкласса Haemosporinа показывает идентичность их морфологического строения. На уровне светового микроскопа в трофозоитах можно различить цитоплазму и ядро. Ядрышко (кариосома) у трофозоитов находящихся в интерфазном состоянии, в световом микроскопе, не всегда различается. Ядра трофозоитов, в большинстве случаев, располагаются в центре клетки, но иногда могут обнаруживаться у одного из полюсов паразитарной клетки. С чем связано такое расположение пока трудно объяснить.
Не вдаваясь в настоящем обзоре о способах деления паразитов, поскольку основные моменты деления паразитических простейших подкласса Haemosporinа, хорошо описаны на уровне субмикроскопической организации простейших. Материалы по этим процессам на русском языке вы можите найти в таких руководствах как: Пироплазмиды (Фауна, Систематика, Эволюция). - Крылов М.В(1981); Маркун Т.А. Класс споровики, 2015 год; - DubeyJ.P. end all. 1998 - Structures of Toxoplasma gondii Tachyzoites, Bradyzoites, and Sporozoites and Biology and Development of Tissue Cysts. Здесь нам бы хотелось обратить внимание читателей на те моменты при делении паразитов, которые при электронно – микроскопическом исследовании часто ускользают от исследователей, но являются общими для многих паразитов, как для токсоплазмид, так и гемоспоридий. Их легче обнаружить при исследовании паразитов, на уровне светового микроскопа, просматривая десятки или даже сотни паразитарных клеток в гистологических срезах органов, мазках крови, в мазках - отпечатках органов. Очень важно при этом применять разный арсенал гистологических и цитологических методов окрасок.
Сравнительный анализ размножающихся кровепаразитов в организме промежуточных хозяев.
Для всех паразитических простейших входящих в подкласс Haemosporinа характерной особенностью является, способность их, вначале инвазионного процесса (в преэритроцитарную и прецистную фазы развития), размножаться в лейкоцитах крови, клетках ретикуло – эндотелиальной системы (РЭС) лимфатических узлов, селезёнке и гепатоцитах. Такой процесс развития и размножения паразитов демонстративно прослеживается, например, у лейшманий, в фазу безжгутикового размножения в клетках РЭС (фото 51); у токсоплазм – в фазу предцистного развития (фото 52 -57).
Фото 54. Macrofago de medulla osea que contiene un elevado numero de leishmanias fagocitadas.
На фотографии показаны многочисленные лейшмании покидающие макрофаг красного костного мозга. Большая часть паразитов имеют продолговато - овальную форму с центрально расположенными ядрами. В некоторых паразитах видны морфологические признаки деления материнской клетки на две части – простое бинарное деление (показано стрелками). Электронный ресурс и режим доступа
http://www.anamerino.com/educacional.html
Фото 55. Fine needle aspirate from cat lung. A ruptured large mononuclear cell with multipleToxoplasma tachyzoites. Wrights stain, 100X.
На фотографии показан разрыв цитоплазмы крупного лимфоцита лёгких и выход из него трофозоитов токсоплазм. Хорошо видно, что паразиты имеют полулунную, продолговато – овальную и грушевидную форму(показано стрелкой).Ядра паразитов расположены или в центре трофозоита или сдвинуты к тупому(заднему) краю паразита.
Фотография взята из работы Kari Addante, DVM и др. - Электронный ресурс и режим доступа-http://vetbook.org/wiki/cat/index.php/Toxoplasma_spp
Фото 56. Мазок, приготовленный из брюшного экссудата белой мыши экспериментально заражённой трофозоитами токсоплазм вирулентного штамма CDN. Препарат обработан акрединовым оранжевым. Показаны два трофозоита в цитоплазме лимфоцита.
Фото 57. Пластинчатый препарат белой мыши убитой через 4 часа после заражения. На фоне хорошо сохранившегося мезотелия отчётливо выделяется гипертрофированный моноцит, в цитоплазме которого находится шизонт округлой формы. Вокруг шизонта видна большая паразитофорная вакуоль. Цитоплазма моноцита вакуолизирована. Окр. По Романовскому - Гимза.
Фото 58. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши на 4 сутки после внутрибрюшинного заражения токсоплазмами вирулентного штамма CDN. Показана начальная фаза формирования псевдоцисты в цитоплазме моноцита. Окраска по Ромоновскому - Гимза.
Фото 59. Пластинчатый препарат брыжейки белой мыши убитой на 5 сутки после внутрибрюшинного заражения токсоплазмами вирулентного штамма «CDN». Показаны разные стадии размножения токсоплазм в моноцитах. Окраска по Романовскому - Гимза.
Фото 60. Гистологический срез. Показаны токсоплазмы в цитоплазме спленоцита и в венозных синусах (Показано стрелками). Широкой стрелкой показано гипертрофированное ядро с трофозоитом.
Таким образом, сопоставление морфологических структур трофозоитов неоспор, бабезий, токсоплазм и саркоспоридий, видимых в световой микроскоп показывает большое их морфологическое сходство.
Сравнивая морфологические формы этих паразитов при делении так же можно найти много сходных структур, как в самих паразитах, так и стадиях их деления. При этом следует напомнить, что у токсоплазм, например, нет строго детерминированных стадий шизогонии, ни в организме промежуточных хозяев, ни в организме дефинитивных хозяев. Этим токсоплазмы отличаются от кокцидий (эймерий), у которых все стадии жизненного цикла строго (генетически) детерминированы. Исследования проведённые J.P.Dubey и J.k.Frenkel (1972) кишечного цикла размножения токсоплазм показали, что у токсоплазм каждая стадия, включая и кишечную шизогонию (кроме гаметоцитов) способна воспроизвести себе подобных и инвазировать, кроме кишечного эпителия, и другие ткани организма хозяина, включая и головной мозг. Схематично кишечный цикл размножения и развития токсоплазм согласно J.P.Dubey и J.k.Frenkel представляются следующим образом:
Схема. Показана схема эндогенного цикла развития и размножения токсоплазм в организме экспериментально заражённых кошек. Схема взята из работы J.P. Dubey, D.S. Lindsay and C.A,Speer «Structures of Toxoplasma gondii, Tachyzoites, Bradyzoites, and Sporozoites and Biology and Development of Tissue Cysts†» опубликованной в 1972 году.
Сведений, как происходит размножение неоспор в кишечнике дефинитивных хозяев, в доступной литературе мы не нашли. Известно лишь, что представители семейства псовых, являются одновременно и дефинитивными и промежуточными хозяевами. А при скармливании собакам, например, плаценты и других тканей КРС содержащих трофозоитов и брадизоитов неоспор, в кишечнике собак наблюдается половая фаза размножения, завершающаяся формированием в кишечнике зигоцист (ооцист). Через 5 суток после заражения зигоцисты, в неспорулированном виде, вместе с калом, выделяются во внешнею среду. Споруляция зигоцист и образование изоспор у неоспор происходит во внешней среде в течение 24 – 72 часов(DUBEY, J. P., and all, 1988 ). В условиях ветеринарной клиники Центра охраны здоровья животных г. Киева, споруляцию мы наблюдали у неоспор через 26 часов после выделения их во внешнею среду. В общем, установленные факты сближают неоспор с токсоплазмами. Однако по какому типу происходит образование гаметоцитов и гамет у неоспор, точных сведений ещё нет.
У токсоплазмид, например, известны два типа формирования гаметоцитов, гамет, зигоцист(ооцист) и их споруляции.
Первый - это токсоплазмозный. Он показан на схеме J.P.Dubey и J.k.Frenkel (1972). Для токсоплазмнозного типа характерной особенностью является то, что после ряда недетерминированных шизогоний в эпителии тонкого отдела кишечника формируются гаметоциты, которые после копуляции в эпителии кишечника образуют зигоцисты. В просвет кишечника, из эпителия ворсинок, выходят неспорулированные зигоцисты, которые затем вместе с калом выделяются во внешнею среду (Фото 58 - 61).
Фото 61. Гистологический срез подвздошной кишки котёнка на 7 сутки после экспериментального заражения цистами токсоплазм. В призматическом эпителии видны две макрогаметы(показано одной стрелкой) и зигоциста с хорошо выраженной оболочкой (Показано двумя стрелками). Окр. По Манну.
Фото 62. Гистологический срез подвздошной кишки котёнка на 7 сутки после заражения. Люминисцентная микроскопия. В просвете кишечника видны зигоцисты (ооцисты) токсоплазм, которые флюоресцируют ярко оранжевым светом.
Фото 63. Показан общий вид мазка свежего кала, взятого через 3 минуты после выхода его из кишечника у котёнка на 5 сутки после заражения цистами токсоплазм. Кал обработан по методу Фюллеборна. При малом увеличении микроскопа видно огромное количество зигоцист токсоплазм.
Фото 64. Деталь фото 63. (Объектив 20 х ок 10). Хорошо видны неспорулированные зигоцисты токсоплазм.
По нашим наблюдениям споруляция зигоцист токсоплазм происходит во внешней среде при достаточной влажности воздуха, хорошем доступе кислорода и температуре плюс 24 -27 градусов, через 5 -6 часов.
Саркоспоридиозный тип. Несмотря на кажущееся сходство эндогенного цикла развития и размножения саркоспоридий с токсоплазмами, у них имеются существенные различия, как в бесполой фазе размножения, так и половой. Установлено, что для поддержания токсоплазм в природе как вида, не обязательна смена хозяев. У саркоспоридий, до описания в природе неоспор, считалось, что саркоспоридии являются строго облигатно - гетероксенными организмами. В их жизненном цикле обязательно должно быть два хозяина - промежуточные, в организме которых происходит бесполое размножение паразитов, вплоть до образования гаметоцитов(гамонтов) и дефинитивные - в организме которых, цистные гамонты, минуя покровный эпителий ворсинок, внедряются в гладко мышечный слой эпителиальной выстилки (Lamina propria), в котором цистные мерозоиты (гамонты) растут, развиваются и дифференцируются на макрогамонтов и микрогамонтов. Из макрогамонтов затем формируются макрогаметы, а в микрогамонтах путём множественного деления образуются жгутиковые микрогаметы. После копуляции микрогамет с макрогаметами образуются зиготы, которые покрываются оболочками и превращаются в зигоцисты. Последние тут же спорулируют, образуя изоспоры, которые распадаются на споры, поскольку имеют очень тонкую оболочку. Поэтому, во внешнею среду, вместе с калом часто выделяются не изоспоры, а споры, в каждой из которых имеется по четыре уже инвазионных (заразных) спорозоитов. При этом надо отметить, что процесс копуляции и дальнейшее развитие зигот происходит не в эпителии слизистой оболочки ворсинок, как у токсоплазм, а в гладкомышечном слое эпителиальной выселки (lamina propria).
Отсюда вытекают два очень важных вывода:
Первый – Если свежий фекалий кошек, содержащий зигоцисты токсоплазм, в течение 5 -6 часов, не опасен для окружающих, то споры саркоспорий являются заразными сразу же после выделения их во внешнею среду.
Второй – Половая фаза развития и образование изоспор происходит внеклеточно, поскольку гладкомышечные клетки, практически не имеют цитоплазмы, а представлены на 90% ядрами. Поэтому можно допустить, что гаметогенез саркоспоридий проходит внутри ядер мышечных клеток lamina propria или всё это происходит в гидролизированной ткани. Подобный процесс нами описан при формировании тканевых цист у безноитий крупного рогатого скота (Фото 62 - 64).
Фото 65. Гистологический срез дермы бычка, подострая стадия безноитиоза. Показано формирование цист по ходу пучка гладкомышечных волокон. Хорошо видна циста с ещё не чётко контурированной оболочкой(широкая стрелка) и рядом с ней множество инвазированных ядер гладкомышечных волокон (стрелки). Окр. железным гематоксилином и эозином.
Фото. 66. Деталь фото № 62. Во многих ядрах хорошо видны паразиты с чётко контурированной цитоплазмой и ядом (Показано стрелками).
Фото. 67. Типичная ядерная псевдоциста B.besnoiti в дерме бычка образовавшаяся по ходу пучка гладкомышечных волокон. В кариоплазме видны мерозоиты содержащие различное количество хроматина, что свидетельствует о разных стадиях бинарного и множественного деления паразитов. Окраска железным гематоксилином и эозином.
Схематично, в последние годы, саркоспоридий цикл токсоплазмид хорошо изображён на рисунке опубликованном в Интернете на сайте http://vetbook.org/wiki/bird/index.php/Sarcocystis_spp,( к сожалению авторы работы не указаны).
Электронный ресурс и режим доступа-http://vetbook.org/wiki/bird/index.php/Sarcocystis_spp .
Так представлялся жизненный цикл саркоспоридий до открытия неоспор. Хотя и ранее некоторые факты по развитию и размножению саркоспоридий не согласовывались с такой схемой и гипотезой строгой облигатной - гетероксенности саркоспоридий. Например, данные R. Payer and R.G. Leek(1979), которые в эксперименте показали, что в острый период течения саркоспоридиоза возбудитель болезни может быть передан при переливании крови реципиенту того же вида хозяина и вызвать заболевание. Эти данные исследователей посчитали неубедительными (Бейер, 1988), как и данные о внеклеточном размножении предцистных мерозоитов Sarcocystis в крови экспериментально заражённых животных (Serna and Senaud, 1977; Fayer and Leek,1979; ). Поэтому, с установлением неоспор как самостоятельного вида, такая концепция должна подвергнуться тщательному обсуждению. Поскольку достоверно доказано, что неоспоры у крупного рогатого скота могут передаваться трасплацетарно как по горизонтали, так и вертикали, и тем самым поддерживать неоспор в природе как вид, минуя половую фазу развития и размножения.
В связи с этим следует вспомнить работы ряда ведущих паразитологов начала прошлого века (Smith, 1901; Smity,1901; Negri, 1907, 1908, 19010; Negrey,1916; Marullaz,1920) , которые экспериментально показали, что цистозоитами Sarcocystis tenella (в то время паразиты в цистах назывались спорами) и Sarcocystis muris можно экспериментально заразить мышей, морских свинок и белых крыс путём скармливания им спор S. tenella и S. мuris Было определено даже время появления паразитов в мышцах - от 45 до 50 дней и появления в мышцах типичного мешочка (цисты), в которых находятся споры- 2 -3 месяца. А Govan M. (1920) не исключал также внутриутробное заражение ягнят при саркрспоридиозе. В подтверждение этому мнению служит сообщение Никольского (1930) о нахождении саркоспоридий в мазках – отпечатках из лёгких плода телёнка. (Цитировано по В.Л. Якимову, 1931 год, стр.261 -271).
Таким образом, результаты приведённых работ показывают, что саркоспоридии, как неоспоры и токсоплазмы могут циркулировать среди промежуточных животных, минуя половую фазу развития. Однако насколько важен такой путь циркуляции саркоспоридий в природе, и какую долю в жизненном цикле паразитов, занимает такая циркуляция саркоспоридий между животными следует ещё уточнить. Можно только предположить, что саркоспоридии, как и неоспоры могут передаваться от животного к животному трансплацентарно. E.Sergent (1921) допускает возможность заражения животных через насекомых (слепни, жигалки)- Цитировано по В.Л.Якимову.
И, ещё один важный момент в понимании эндогенного размножения неоспор – как ведут себя изоспоры неоспор в желудочно – кишечном тракте? У кошек, например, при заражении их изоспорами токсоплазм, нет прямого размножения в эпителии кишечника от изоспоры до зигоцисты(ооцисты). Прежде чем появится зигоцистам токсоплазм в кишечнике кошек, спорозоиты вышедшие из изоспор в желудке, должны попасть в тонкий отдел кишечника. А затем, не размножаясь в эпителии кишечника, паразиты проникают в подслизистую оболочку, образуют первичный очаг. И из него трофозоиты токсоплазм проникают во внутренние органы. Пройдя здесь вегетативную фазу развития и размножения, часть паразитов (мирозоитов), возвратившись в кишечник, дают начало половой фазе размножения завершающейся образованием зигоцист (ооцист). И по – видемому, не все стадии развития способны достигать кишечника. Поэтому, у токсоплазм эндогенный цикл размножения от изоспоры до зигоцисты растягивается до 20 – 30 суток, и не все кошки, в крови которых обнаруживаются антитела к токсоплазмам, при явной клинической картине токсоплазмоза, выделяют зигоцисты. Этот факт не все знают, поэтому многие врачи ошибочно связывают отсутствие зигоцист в кале кошек, при положительных серологических реакциях, с появлением антител в организме кошек.
Какой эндогенный цикл изоспоры неоспор проходят в организме дефинитивных хозяев пока неизвестно. И это не удивительно, на изучение жизненного цикла, паразита подобного неоспорам, Toxoplasma gondii, учёным понадобилось более ста лет. Но те знания в вопросах биологии токсоплазм, их жизненного цикла, паразитохозяенных отношений, диагностики и лечения токсоплазмоза, можно надеяться помогут быстрее решить проблему неоспороза не только в ветеринарии, но и медицине. Академик И.Г.Галузо и профессор Д.Н.Засухин, основоположники изучения токсоплазмоза и других токсоплазмид в СССР, на каждой конференции, каждом семинаре постоянно напоминали молодым учёным: - «Чем глубже и детальнейше будет изучен жизненный цикл токсоплазм, влияние их на организм человека и животных, тем быстрее будут решаться проблемы и с другими заболеваниями вызываемые токсоплазмидами». А академик И.Г.Галузо в последней своей книге «Жизненный цикл токсоплазм», вышедшей в 1974 году, в заключительной главе писал: «Теоретическое осмысление токсоплазмоза выдвигает необозримый ряд новых вопросов в проблеме токсоплазмид, и особенно в вопросах их паразито – хозяинных отношений. Это внесёт большой вклад в теорию вопроса и окажет помощь практикам – клиницистам и эпизоотологам».
Важным моментом в понимании кишечного цикла неоспор, на что нам хотелось бы обратить внимание, является препатентный и патентный периоды. У Toxoplasma gondii препатентный и патентный период зависит от времени развития тканевых цист в организме промежуточного хозяина. По нашим исследованиям при заражении, например, котёнка цистами токсоплазм развивавшимися в мозгу белых мышей 3 -4 месяца, препатентный период равняется 2-3 суткам, патентный 6 -10 суткам. При заражении цистами, развивавшимися в головном мозгу мышей 20 – 30 суток, препатентный период равняется 10 -15 дням, а патентный растягивается до 20 суток. Важно отметить, что при этом, после прекращения патентного периода у котят на протяжении 5 -6 месяцев после заражения (срок наблюнения) зигоцисты токсоплазм не появлялись (Галузо, 1974). Тогда как у представителей семейства псовых строго детерминированного патентного периода нет. Зигоцисты неоспор у собак выделяются переодически. К сожалению, этот феномен ещё не изучен, как неизвестно. что происходит с брадизоитами и трофозоитами неоспор оставшихся в организме собак, в период прекращения выделения зигоцист во внешнию среду?
У токсоплазм, например, точно установлено, что трофозоиты не всех штаммов при пероральном их введении кошкам дают начало половой фазе развития в кишечнике кошек (А.М.Бугаев,1974).
Возможно, что –то подобное наблюдается и с неоспорами в организме собак? Будем ждать таких открытий и публикаций.
Таким образом, сравнительный анализ различных стадий развития и размножения трофозоитов неоспор и токсоплазм в организме экспериментально заражённых животных (промежуточных хозяев), даёт основание заключить, что стадии размножения трофозоитов (тахизоитов) в световом микроскопе имеют много общих морфологических структур. Учитывая идентичность морфологического строения тахизоитов, можно предположить, что тахизоиты неоспор, так же как и токсоплазмы делятся не только путём эндодиогении и полиэндогинии, но и путём простого бинарного деления, шизогенией и путём расщипления материнской клетки на несколько мерозоитов, описанных у токсоплазм J.P.Dubey и I.J.Frenkel в 1972году. Все обнаруженные особенности развития и размножения неоспор в организме экспериментально заражённых животных, подтверждают правомерность включения неоспор в отряд Toxoplasmida на уровне семейства Neosporidae, подкласса Haemosporinа, класса Sporozoа.
Обсуждение.
Современный уровень знаний по кровяным споровикам (гемоспоридиям) и токсоплазмидам дают возможность более или менее точно определить систематическое положение и неоспор. В своё время, академик И.Г.Галузо при написании главы «Единство природы токсоплазм и изоспор» в книге «Жизненный цикл токсоплазм», изданной в 1974 году,
в подклассе Coccidiomorpha выделил три типа жизненных циклов паразитов.
Первый тип - это кокцидийный. В подкласс Coccidiomorpha писал И.Г.Галузо – «входит отряд Coccidiida, с которыми токсоплазмы могут быть сравнимы как наиболее близкие формы, однако отнести их к этому отряду нельзя по ряду признаков. Представители отряда Coccidiida, как известно - моноксенные паразиты. Они способны к развитию в организме одной особи, одного вида хозяина - от спорозоита до ооцисты. Поэтому такой тип называют однохозяиным. При этом паразиты развиваются по трёхфазному типу: шизогония, гаметогония, спорогония». Этот тип развития и размножения многим хорошо известен ещё по схемам школьных учебников по биологии.
Схема размножения эймерий. Электронный ресурс и режим доступа - http://www.zoodrug.ru/topic2876.html
Второй тип – это Малярийный.
Схема взята из работы Маркун Т.А. - «класс споровики», Электронный ресурс и режим доступа-
http://bono-esse.ru/blizzard/A/Posobie/Bio/sporoviki.html
Он сводится, писал И.Г.Галузо, «к развитию паразитов в организме двух особей разных видов хозяина: пролиферация (бесполое развитие и размножение) в организме позвоночного животного, половое и спорогония - в организме беспозвоночного (комара - переносчиков). Особенность этого типа развития и размножения в отличие от кокцидийного является обязательная смена хозяев. Как позвоночное не может быть источником заражения для позвоночного хозяина, так и комар не заражается от комара».
Третий тип - это токсоплазмозный. Характерной особенностью его, подчёркивал И.Г.Галузо, является не обязательная смена дефинитивного хозяина промежуточным. В организме промежуточного хозяина пролиферация проходит беспрерывно. Она может протекать, переходя от одного хозяина к другому без участия половой стадии размножения и спорогонии. В то же время половая фаза развития и размножения от спорозоита до зигоцисты (ооцисты), в свою очередь проходит в организме дефинитивного хозяина, минуя промежуточного, и, в общем, в жизненном цикле паразитов совершенно не обязательна смена - чередование хозяев: дефинитивный – промежуточный - дефинитивный. Такого типа развития, писал И.Г.Галузо, «мы не знаем ни у одного отряда споровиков».
Необходимо отметить, что при написании И.Г.Галузо этого раздела книги точно не были изучены жизненные циклы саркоспоридий, а в отношении неоспор ещё ничего не было известно вообще. Да и в отношении пироплазмид не всё было ясно.
В последние годы, наши знания о токсоплазмидах пополнились новыми научными данными, что позволило более полно представить циркуляцию токсоплазм в природе. Более полно токсоплазмозный тип размножения и циркуляции паразитов в природе представлен на схеме:
Токсоплазмозный тип циркуляции паразитов в природе.
Схема взята из работы Маркун Т.А. - «класс споровики», Электронный ресурс и режим доступа -
http://bono-esse.ru/blizzard/A/Posobie/Bio/sporoviki.html.
В последние два десятилетия получены новые данные не только по токсоплазмидам, но и по пироплазмидам. Эти данные позволяют среди паразитических простейших выделить четвёртый тип жизненных циклов паразитов - пироплазмозный. Он эволюционно связывает малярийный и токсоплазмоподобные жизненные циклы.
В общих чертах, пироплазмозный тип повторяет жизненный цикл малярийного плазмодия, но имеет свои характерные отличия, которые сближают их с токсоплазмидами. Например, при малярийном типе развития паразитов должна быть обязательная смена хозяев. И от позвоночного хозяина малярийный плазмодий не может передаваться механически позвоночным животным, и комары не могут заражать малярийными плазмодиями комаров. Пироплазмозный же тип развития паразитов предусматривает циркуляцию их в крови позвоночного хозяина длительное время и возможность заражать позвоночных животных механическим путём. В эксперименте, например, здоровые животные легко заражаются путём введения крови больного пироплазмозом животного под кожу, в вену, интраперитонеально, инрапульмонально и т.д. Даже смазыванием кровью скарифицированной кожи можно получить заражение (Якимов, 1931год, стр.408). Какая доля такого (механического) способа передачи пироплазмид от позвоночного животного позвоночному в природе пока неизвестна. Если взять, например, из отряда Toxsoplasmidae, возбудителя заболевания крупного рогатого скота (Besnoitia besnoiti), то механический путь передачи этих паразитов - это единственный, пока, известный путь заражения животных.
Сравнительный анализ жизненных циклов токсоплазмид и пироплазмид показывает множество общих характерных свойств:
1.Морфологическое сходство трофозоитов в фазу бесполого развития и размножения в организме промежуточных хозяев.
2.Способность трофозоитов размножаться как внутриклеточно, так и внеклеточно
3. Использование в жизненном цикле двух хозяев - промежуточного и дефинитивного. Исключение из этого правила составляют возбудители безноитиоза крупного рогатого скота(Besnoitia besnoiti), у которых половая фаза размножения отсутствует, или, по крайней мере, ещё не обнаружена.
3. Способность, на определённых стадиях жизненного цикла, размножаться как бинарно (путём простого прямого деления, эндодиогенией, полигенией), так и шизогенией.
4.Наличие в эндогенном цикле размножения особого способа множественного деления паразитов (шизогонии) - путём расщипления материнской клетки на множество мерозоитов. Этот способ деления впервые описанный J.P. Dubey и J.K.Frenkel(1972) при изучении кишечного цикла размножения токсоплазм в организме котят, часто встречается и у токсоплазм, и пироплазм при размножении их в организме промежуточных хозяев.
Токсоплазмиды большое сходство имеют и с представителями семейства Theileriidae. Как токсоплазмиды в предцистную фазу, так и тейлерииды в предэритроцитарную фазу, вначале, размножаются в лейкоцитах, и клетках РЭС различных органов. Затем, тейлерии, до проникновения в организм клещей, внедряются в эритроциты и проделывают несколько стадий эритроцитарного размножения. А токсоплазмиды, до попадания в кишечник хищников, проходят в организме промежуточных хозяев фазу развития и размножения в головном мозге и скелетных мышцах. Объединяет их и то, что для своего развития пироплазмиды и токсоплазмиды используют ткани и органы богатые кислородом и питательными веществами (Хэм и Норман, гистология, том четвёртый, 1979). При этом у токсоплазмид основной путь передачи возбудителя от животного к животному происходит через хищничество. Трансмиссивный путь имеет место но, практически, не играет большой роли. Для большинства токсоплазмид этот путь мало значим в сохранении токсоплазмид в природе. Только у возбудителя безноитиоза крупного рогатого скота ( Besnoitia besnoiti) трансмиссионный путь передачи возбудителя от животного животному, является основным и напоминает таковой у кровепаразитов. Однако у B. вesnoiti не доказано размножение паразитов в организме кровососущих насекомых. Это свидетельствует, что B. вesnoiti, или потеряли уже связь с кишечной фазой развития и осваивают новые эволюционные пути для поддержания вида в природе, или наоборот «ищут» своего напарника в качестве дефинитивного хозяина среди хищных млекопитающих, используя на данном этапе эволюции жалящих кровососущих насекомых в качестве транзитных хозяев.
В отношении неоспор определение точного систематического положения ещё затрудняется многими белыми пятнами в их жизненном цикле и особенно в эндогенном развитии и размножении. Однако имеющиеся сведения о неоспорах свидетельствуют, что их жизненный цикл и особенно эндогенное развитие и размножение, сходно (но не идентично!) с токсоплазмами. Хотя и здесь необходимо подчеркнуть, что у токсоплазм кишечный цикл в организме кошек имеет место, но это не основной путь поддержания вида в природе и принципиального значения не имеет. Тогда как у неоспор кишечный цикл играет основную роль в сохранении возбудителя в природе. При этом надо заметить, что трансплацентарный путь передачи неоспор без кишечного полового цикла не в состоянии обеспечить такое широкое распространение неоспор в природе и особенно среди крупного рогатого скота и собак.
Схематично циркуляцию неоспор в природе более или менее полно отображена на схеме.
Схема взята из работы Rómulo Aycachi Inga-Neospora caninum – Электронный ресурс и режим доступа-
http://www.monografias.com/trabajos30/neospora-caninum/neospora-caninum.shtml
Несмотря на многие недочёты, схема показывает основные пути циркуляции неоспор в природе. Чётко, например, показаны пути передачи паразита от животного к животному. Особенно важно отметить, что неоспоры, в виде трофозоитов или брадизоитов, передаются от животных к животному трансплацентарно – через плаценту, в утробе матери. Однако, в схеме не показано, что трофозоиты и брадизоиты могут передаваться трансплацентарно телятам из поколения в поколение (по вертикале) минуя половую фазу развития и размножения в кишечнике собак. А некоторые исследователи считают, что трансплацентарный путь передачи неоспор является преобладающим.( Anderson и др., 2000; Gharekhan и Tavoosidana, 2013).
Dijkstra T. (2002) в своей работе Horizontal and vertical transmission of Neospora caninum показал, что 95% телят заражённых неоспорозом роделись от серопозитивных коров, клинически у которых заболевание не проявлялось. В связи с этим автор делает заключение, что у коров вертекальный путь передачи неоспор потомству является преобладающим.Сравнительный анализ морфологии и жизненного цикла неоспор с токсоплазмидами и гемоспоридиями показывает, что между неоспорами и указанными группами паразитов имеется прямая эволюционная связь.
Полученные научные данные об эндогенном цикле размножения и влиянии неоспор на организм животных свидетельствуют, что жизненный цикл неоспор и их взаимоотношение с организмом хозяина, подобны таковым у токсоплазм. Это позволяет неоспор, как и других токсоплазмоподобных паразитов, относяти к Классу Sporozoа, Подклассу Haemosporinа, Отряду Toxoplasmida, Симейству Neosporidae, Роду Neospora, Виду N. Caninum; Neospora hughesi (Более подробнее о систематике неоспор и других токсоплазмид см. в статье «Безноитиоз КРС» на этом же сайте.
Список использованной литературы.
А. Монографии общего характера:
- Бейер Т.В., Шибалова Т.А., Костенко Л.А. Цитология Кокцидий.Ленинград,из.Наука, 1978.
- Бейер Т.В. Современное представление о саркоспоридиях((SARCOCYSTIS, EIMERHDAE, SPOROZOA, APICOMPLEXA), морфофункциональная организация, жизненный цикл, практическое значение.-Жур.Паразитология, 22, 1, 1988.
http://www.zin.ru/journals/parazitologiya/content/1988/prz_1988_1 1_Beyer.pdf.
- Велю Г. Пироплазмы и пироплазмозы, перевод с французского А.А. Маркова, под редакцией проф. С.И. Драчинского, Издательство Сельзозгиз, Москва, 1930год.
- И.Г. Галузо., С.И. Коновалова. Диагностика токсоплазмоза животных, Алма – Ата – 1971.
- Галузо И.Г. Жизненный цикл токсоплазм, Издательство «Наука», Казахская ССР, Алма – Ата, 1974.
- Крылов М.В. Пироплазмиды (Фауна, Систематика, Эволюция).Изд. «Наука» Ленинград, 1981.
- Маркун Т.А. Класс споровики, 2015 год. Записная книжка врача акушера – гинеколога.
http://bono-esse.ru/blizzard/A/Posobie/Bio/sporoviki.html
http://www.zb.unibe.ch/download/eldiss/08strohbusch_m.pdf
- Смердова М.Д. Патологическая анатомия, секционный курс, судебно –ветеринарная экспертиза. Оформление электронной версии:
Климова Елена Анатольевна, врач-ординатор-патологоанатом кафедры хирургии и патологической анатомии. Электронный ресурс и режим доступа http://www.kgau.ru/distance/vet_03/patanatomia/glos.html
Красноярский государственный аграрный университет, 2010.
© Центр дистанционного обучения, 2010г.
- Шевкунова Е.А. История изучения токсоплазмоза в Советском Союзе –Хроника исследований, воспоминания, письма.Изд. «Большая Российская Энциклопедия, Москва ,2006.
- Якимов В.Л. Болезни домашних животных вызванные простейшими (PROTOZOA) – Ветеринарная протозоология, Ленинград, Сельколхозгиз, 1931.
- Arthur W. Ham; David H.Cormmacr – Hystology, 1983. Department of Anatomy, Division of Histology, Faculty of Medicine,University of Torontо. В пяти томах, перевод с английского канд. мед.наук В.Л. Быкова, под редакцией д-ра мед. наук Ю.И. Афанасьева и д-ра биол. наук Ю.С.Ченцова.
- Maria Strohbusch; B. Gottstein and all . Neospora caninum.
Graduate School for Cellular and Biomedical Sciences University of Bern PhD Thesis. http://www.zb.unibe.ch/download/eldiss/08strohbusch_m.pdf.
В. работы по частным вопросам:
- Акиншина Г.Т. Изучение возбудителя токсоплазмоза в культурах тканей. Автореферат канд.дис. М., 1964.
- Акиншина Г.Т. , Засухин Д.Н. Intranuclearlocalization of Toxoplasma gondii and Besnoitia jellisoni inconditions of tissue culture and remarks jn the intranuclear parasitism. – Acta protozool.(Warszavwa),1971,v.8.p.341 -348.
- Акиншина Г.Т. , Засухин Д.Н. Актуальные проблемы токсоплазмоза. – Сборник докладов на Всесоюзном симпозиуме по токсоплазмозу 14 -16 декабря 1971г. М.,1971.стр.148.
- Акиншина Г.Т. Система паразит – клетка хозяина. Морфо – функциональный анализ и моделирование развития возбудителя токсоплазмоза и некоторых других внутриклеточных паразитов – простейших. Автореф. Дис. Доктора биологических наук. М.1983.41стр.
- Бакшеев Д,И. Неоспороз - новая гинекологическая патология крупного рогатого скота.- Журнал «Зооиндустрия», 2001,№7.
http://vettorg.net/magazines/3/2001/29/77/.
- Бугаева Л.А., Вустина У.Д.Цитохимические особенности разных стадий жизненного цикла токсоплазм.- В кн.: Жизненный цикл токсоплазм (развитие, биология, циркуляция в природе). Алма –Ата, «Наука», 1974, с.69 -79.
- Бейер Т.В., Сиим Й.Х., Хатчисон У.М. Цитохимическое исследование разных стадий жизненного цикла Toxoplasma gondii. Цитология, 1977,т.19 №8 с.930-934.
- Бугаев А.М., Новинская В.Ф. НЕКОТОРЫЕ В сб.: Успехи протозоологии. Третий Международный Конгресс Протозоологов. Л.,1969,стр.242 -243.
- Бугаев А.М., Вустина У.Д. - Реакция организма хозяина в связи с особенностями эндогенного цикла развития токсоплазм. В кн.: Жизненный цикл токсоплазм. Алма –Ата, «Наука», 1974, с.173 – 193.
- Бугаев, А. М. Токсоплазмоз новый взгляд на старую проблему (биология, циркуляция в природе, отношения паразит хозяин, систематика). Часть 1. НМТ. Новые медицинские технологии. 2005. № 4. . с .42-46.
- Бугаев, А. М. Токсоплазмоз новый взгляд на старую проблему (биология, циркуляция в природе, отношения паразит хозяин, систематика) Часть II. НМТ. Новые медицинские технологии. 2005. № 5. с. 25 -31.
- Бугаев А.М. Случай токсоплазмоза у взрослого кота. Статья помещена на сайте 15 января 2013 года.
- Бугаев В.А., Бугаев, А. М. Токсоплазмоз мелких домашних животных - Мифы и факты. Статья помещена на сайте 11 ноября 2013 года.
- Бугаев А.М. Безноитиоз крупного рогатого скота. Раздел первый. Общие сведения о безноитиях и безноитиозе животных. Краткая историческая справка. Статья помещена на сайте 15 декабря 2013 года.
- Бугаев А.М. Безноитиоз крупного рогатого скота. Раздел второй. Паразитические простейшие морфологически и эволюционно сходные с Besnoitia besnoiti. Статья помещена на сайте 15 декабря 2013 года.
- Бугаев В.А., Бугаев, А. М. Токсоплазмоз. Раздел первый. - Актуальность проблемы, терминология, патоморфологическая характеристика первичного очага и токсоплазмозного сепсиса при экспериментальном заражении животных. Статья помещена на сайте 25 ноября 2014 года.
- Бугаев В.А., Бугаев, А. М. Токсоплазмоз. Раздел второй. Патоморфологическая характеристика первичного очага при экспериментальном заражении животных. Статья помещена на сайте 25 ноября 2014 года.
- Всеволодов Б.П. Материалы по патоморфологии безноитиоза крупного рогатого скота. – Тезисы докладов научной конференции Алма –Атинского ордена Трудового Красного Знамени зооветеринарного института, 1959, стр.60.
- Всеволодов Б.П. О безноитиозе крупного рогатого скота в Казахстане. Труды четвёртой конференции по природной очаговости болезней и вопросам паразитологии Казахстана и республик Средней Азии. 15 – 20 сентября, 1959.Издательство Академии наук Казахской ССР, Алма –Ата, 1961. Вып.3. стр. 196 - 206.
- Вустина У.Д. Хранение штаммов токсоплазм с использованием дефинитивного хозяина. В кн.: Жизненный цикл токсоплазм. Алма –Ата, «Наука»,1974, с.147 – 157.
- Вершинин И.И., Леонтьев Ф.Ф., Петренко В.И. К изучению изоспорозов домашних плотоядных. – Труды Свердловского с –х. института, том.31, стр. 101 – 113.
- Галузо И.Г. Новое о токсоплазмах и их циркуляции в природе. – Тез.докл.Первого Всесоюзного общества протозоологов. Баку, 1971, стр.25 – 27.
- Галузо И.Г. Новые данные в изучении жизненного цикла токсоплазм и использование их в практике. В кн.: Диагностика токсоплазмоза животных. Алма –Ата, 1971,с.122 – 136.
- Галузо И.Г. Проблемы токсоплазмоза животных в СССР. – В сб.: Природная очаговость болезней и вопросы паразитологии животных. Вып.6.ч.1.Ташкент,1971, стр.146 -152.
- (Галузо И.Г.) Galuzo I.G. Problems of the ecologe of toxoplams (Toxoplasma gondii). – Protozoology,1977,v.3 p.159 -168.
- Галузо И.Г. Единство природы токсоплазм и изоспор. О положении Toxoplasma gondii в системе простейших. - В кн.: Жизненный цикл токсоплазм,
Алма –Ата, «Наука»,1974, стр.219 -221.
- Галузо И.Г., Коновалова С.И. Бугаев А.М. Жизненный цикл токсоплазм и их циркуляция в природе. В сб.: Вопросы природной очаговости болезней. Вып.5 Алма –ата. 1972.стр. 64 -99.
- Галузо И.Г., Коновалова С.И. Поведение вирулентных штаммов токсоплазм в культуре ткани и в эмбрионах кур. В сб.: Успехи протозоологии.Л.,1969,стр.241 -242.
- Галузо И.Г., Коновалова С.И. Диагностика токсоплазмоза животных.
Алма –Ата 1971. Стр.18 -19.
- Галузо И.Г., Бугаев А.М. О жизненном цикле Toxoplasma gondii и положении вида в системе. В кн.: Материалы Первого съезда Всесоюзного общества протозоологов. Баку,1971, стр.201 – 203.
- Галузо И.Г., Бугаев А.М., Коновалова С.И., Вустина У.Д. Жизненный цикл токсоплазм. В кн.: Жизненный цикл токсоплазм, Алма –Ата, «Наука»,1974, стр.15 – 43.
- Засухин Д.Н. Некоторые нерешённые вопросы проблемы токсоплазмоза. В кн.: Проблемы токсоплазмоза животных. Алма –Ата,1966, стр.9 -11.
- Засухин Д.Н., Акиншина Г.Т., Калякин В.Н. и др. Новое в изучении токсоплазм и близких организмов.- В кн.: Зоопаразитология Т.3.Паразитические простейшие. М.1973, стр.7 -9.
- Коновалова С.И. Биологические особенности токсоплазм, их циркуляция в природе и вопросы иммунитета. Автореферат докторской дисс.Алма –Ата,1972г.
- Пак С.М. Циста как фаза жизненного цикла токсоплазм. В кн.: Жизненный цикл токсопзм. Алма –Ата, «Наука»,1974, стр. 43 – 58.
-Чернышова О.А. Неоспороз крупного рогатого скота :Эпизоотология, диагностика. Автореферат кандидатской диссертации, 2000 год.
- Якимов В.Л. Паразиты неопределённой природы. В кн.: Болезни домашних животных вызываемые простейшими. Сельколхозгиз, Москва,1931г. стр.367 -371.
- Шустров А.К., Хавкин Т.Н. Святухина О.А. Развитие Toxoplasma gondii и связанные с этим реактивные процессы в брюшине белых мышей. – Паразитология, 1968,т.2.№1, стр.83 – 90.
- Ashlie Hartigana, 1, Bing Y. Zhua, 1, Damien P. Higginsa, Paul J. Canfielda, Jan Šlapetaa, опубликованной в журнале Veterinary Parasitology Volume 159, Issue 2, 5 February 2009, Pages 105–111, выполненая в Австралии.
- Bjerka˚s I, Mohn SF, Presthus J. Unidentified cyst-forming sporozoon causing encephalomyelitis and myositis in dogs. Z. Parasitenk 1984;70:271
- Cummings и др, 1988;. Dubey др, 1988;. Bjerkas и Presthus, 1989; Dubey и Линдси, 1989b; Speer и Dubey, 1989). ??
- Cerna Z., Senaud J . Sur un type nouveau de multiplication asexuee d'une Sarcosporidie, dans le foie de la souris. — C. R. Acad. Sci., Paris, 1977, t. 285, p. 347—349.
- Dijkstra T, Eysker M, Schares G, et al. Dogs shed Neospora caninum oocysts after ingestion of naturally infected bovine placenta but not after ingestion of colostrum spiked with Neospora caninum tachyzoites. Int J Parasitol 2001;31:747–52.
- DubeyJ.P., Lindsay D.S., Speer. Structures of Toxoplasma gondii Tachyzoites, Bradyzoites, and Sporozoites and Biology and Development of Tissue Cysts.- Clinical Microbiology Reviews, v.11(2) 1998, Apr.
- Dubey J.P. and J.k.Frenkel J. K. Cyst – induced toxoplasmosis in cats.- J.Protozool.,1972, v. 19, p.155 -177.
- DUBEY, J. P., CARPENTER J.L., SPEER C.A. - Newly recognised fatal protozoan disease of dog. J. Am. Vet. Med. Assoc., 1988, 192:1269-1285.
- DUBEY, J. P., HATTEL A.L., LINDSAY D.S., TOPPER M. S., -1988b. Neonatal Neospora caninum infection in dogs; Isolation of the causative organism and experimental transmission. J. Am Vet. Med. Assoc. 1988,193: 1259-1263.
- Dubey J.P, Lindsay D.S. A review of Neospora caninum and neosporosis. Vet Parasitol 1996; 67:1–59.
- Dubey J.P. Review of Neospora caninum and neosporosis in animals.
Korean J. Parasitol 2003;41:1–16.
- Dubey J,P,.Schares G., Ortega – Mora M. - Epidemiology and Control of Neosporosis and Neospora caninum. Clinical Microbiology Reviews, 2007 Apr; 20(2): 323–367.
- Faye r R., Lee k R. G. Sarcocystis transmitted by blood transfusion. — J. Parasitol., 1979, vol. 65, N 6, p. 890—893.
- Faye r R., Lee k R. G. Sarcocystis transmitted by blood transfusion. — J. Parasitol., 1979, vol. 65, N 6, p. 890—893.
- Cerna Z., Senaud J . Sur un type nouveau de multiplication asexuee d'une Sarcosporidie, dans le foie de la souris. — C. R. Acad. Sci., Paris, 1977, t. 285, p. 347—349.
- Kari Addante, DVM; Holly A. Moore, DVM; Bruce E. LeRoy, DVM, PhD Feline Toxoplasmosis and its Zoonotic Implications,Class of 2006 (Addante) and Department of Pathology (Moore, LeRoy), College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Athens, GA 30602-7388.
- Rómulo Aycachi Inga. Neospora caninum – Parasitología.
http://www.monografias.com/trabajos30/neospora-caninum/neospora-caninum.shtml#ixzz3VFLICF66
http://www.monografias.com/usuario/perfiles/romulo_aycachi_inga.
Продолжение статьи читайте здесь.
Ресурс для обратной связи:
Телефон для контакта - (044) – 426 – 47 – 76(78).
Email: bugaev@ukr.net
- © 2013-2015 www.vetbugaev.kiev.ua
- Все права защищены.
- Использование любых материалов, размещённых на сайте, разрешается при условии ссылки на www.vetbugaev.kiev.ua
- При копировании материалов со страницы www.vetbugaev.kiev.ua для интернет-изданий – обязательна прямая открытая для поисковых систем гиперссылка. Ссылка должна быть размещена в независимости от полного либо частичного использования материалов. Гиперссылка (для интернет- изданий) – должна быть размещена в подзаголовке или в первом абзаце материала.